武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。

植物細(xì)胞壁抗降解屏障是限制秸稈生物質(zhì)資源化轉(zhuǎn)化利用的關(guān)鍵因素，而木質(zhì)纖維素的阿魏酸化是禾本科植物細(xì)胞壁抗降解屏障形成的重要分子基礎(chǔ)。植物阿魏?；D(zhuǎn)移酶(Feruloyl transferase)是負(fù)責(zé)將阿魏酸從阿魏酰CoA轉(zhuǎn)移至阿拉伯木聚糖分子上的關(guān)鍵酶之一，在阿拉伯木聚糖與木質(zhì)素的連接上起到關(guān)鍵作用，與植物細(xì)胞壁抗降解屏障的形成關(guān)系十分密切，因此對(duì)阿魏?；D(zhuǎn)移酶基因開展研究將可以為禾本科能源植物開發(fā)利用以及農(nóng)作物秸稈的再生利用提供新的思路。本文對(duì)禾本科模式植物二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的一個(gè)可能的阿魏酰基轉(zhuǎn)移酶基因Bra1進(jìn)行研究，其主要研究結(jié)果如下:1.以二穗短柄草成熟莖組織mRNA為材料，采用RT-PCR技術(shù)得到了Bra1(5g14720)基因的全長cDNA序列，其序列大小為1369 bp，生物信息學(xué)分析表明該基因的開放閱讀框(ORF)編碼443個(gè)氨基酸殘基，其編碼蛋白質(zhì)的理論分子質(zhì)量為48.45 kDa。進(jìn)一步的基因原核表達(dá)以及蛋白質(zhì)譜分析也表明該基因的開放閱讀框能正確編碼一個(gè)BAHD?；D(zhuǎn)移酶蛋白，其分子量大小與理論值基本一致。2.Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD?；D(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域，說明Bra1基因是BAHD?；D(zhuǎn)移酶基因家族的一個(gè)成員。

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構(gòu)建了植物表達(dá)載體pBRSAg，該載體具有完整的植物表達(dá)元件，CaMV35S啟動(dòng)子、農(nóng)T-DNA左右邊界、植物報(bào)告基因gus和植物選擇標(biāo)記基因hpt，適用于農(nóng)的轉(zhuǎn)化；通過凍融法將重組質(zhì)粒pBRSAg轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)LBA4404中，利用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化葉盤，經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得植株。抗性植株經(jīng)GUS染色和PCR檢測為陽性，初步表明表面抗原基因在中得到表達(dá)。

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