凍存袋細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟

1.操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時(shí)蓋子易松掉。

3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。

4.取出冷凍管，立即放入3℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，CS250凍存袋價(jià)格，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。

5.取出解凍之細(xì)胞懸浮液，200-074-400凍存袋價(jià)格，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10~1:15)，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細(xì)胞懸浮液作存活測(cè)試。

6.解凍后是否立即去除冷凍保護(hù)劑，依細(xì)胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護(hù)劑。惟若要立即去除，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心 1000rpm，5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

凍存袋方法的改進(jìn)

自1977年以來(lái)，我們應(yīng)用四級(jí)梯度降溫凍存法對(duì)30余株哺乳動(dòng)物細(xì)胞及2株節(jié)肢動(dòng)物細(xì)胞共1000多支安瓶進(jìn)行了冷凍保存，效果較好，大部分細(xì)胞的活存率在70%以上。在此基礎(chǔ)上對(duì)8株抗登革4型(DEN一4)病毒雜交瘤細(xì)胞400多支安靚進(jìn)行了凍存。鑒于四級(jí)降溫凍存法步驟多，需要經(jīng)過4℃冰箱和一20℃冰箱長(zhǎng)達(dá)7~8小時(shí)的梯度降溫，較難適應(yīng)單工作中細(xì)胞凍存的需要。因此，自1982年以來(lái)我們摸索了影響細(xì)胞凍存的主要因素，確定了雜交瘤細(xì)胞凍存的適保護(hù)劑濃度(1.2〕，并研制成功細(xì)胞凍存簡(jiǎn)易裝置。

凍存袋介紹

細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，凍存袋價(jià)格，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，200-074-401凍存袋價(jià)格，起到了細(xì)胞保種的作用。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變，有限細(xì)胞系終會(huì)發(fā)生衰老，所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染。已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源，更換細(xì)胞系成本高昂，而且耗費(fèi)時(shí)間。可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。

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