凍存袋細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟

1.操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。

3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。

4.取出冷凍管，立即放入3℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。

5.取出解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10~1:15)，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。

6.解凍后是否立即去除冷凍保護劑，依細(xì)胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除，CS250凍存袋哪家好，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心 1000rpm，200-074-400凍存袋哪家好，5分鐘，凍存袋哪家好，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

凍存袋的基本原理

利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或DMSO，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當(dāng)溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

凍存袋介紹

細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，200-074-401凍存袋哪家好，以便長期儲存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變，有限細(xì)胞系終會發(fā)生衰老，所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染。已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源，更換細(xì)胞系成本高昂，而且耗費時間。可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細(xì)胞。

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