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什么固時候脫水？

激1活平衡溶液，上樣液體無需抽干

其主要目的有兩個，一個是清洗填料，洗去填料內(nèi)部的底面，另一個是促進(jìn)鍵合分子的展開。在某些長鏈的官能團(tuán)中，如C18在干燥填料中不能完全展開，而活化可使填料官能團(tuán)濕潤伸展，使其對目標(biāo)化合物保持較大吸附活性。因此，激1活平衡過程并不需要進(jìn)行抽水。

淋巴1結(jié)需抽干主要有兩個原因：

②一般淋洗液與洗脫液的極性差異會很大(如淋洗液為水，洗脫溶劑為正己烷或二氯甲1烷)，兩種溶劑不能互溶或溶解，從而造成洗脫液流不下或流速慢，妨礙洗脫溶劑與目標(biāo)物接觸，洗脫效果差，NH2固相萃取柱品牌，回收率低。

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所分析的目標(biāo)化合物必須具有下列一種或多種功能基團(tuán)，才能通過離子作用力從樣品溶液中分離出來。

(1)可產(chǎn)生陽離子(帶正電荷)的功能(2)可產(chǎn)生陰離子(帶負(fù)電荷)的功能

此外，所分析的目標(biāo)化合物必須在一定 pH條件下才能發(fā)生離子化或中性化反應(yīng)。為了有效地利用離子交換機(jī)理在 SPE柱中吸附目標(biāo)化合物，需要滿足兩個條件：

目標(biāo)化合物中的離子與吸附劑基團(tuán)中的離子態(tài)帶相反電荷；

(2)萃取環(huán)境中的 pH必須使目標(biāo)化合物和吸附物上的功能基團(tuán)同時帶電；

(3)萃取環(huán)境中不得含有高濃度的競爭化合物，其電荷與目標(biāo)化合物相同。

實踐中，為了滿足前兩個條件，以保證99%以上的目標(biāo)化合物和固相萃取吸附劑表面的官能團(tuán)可以呈離子型或中性型，應(yīng)根據(jù)樣品或 SPE柱吸附劑官能團(tuán)的 pKa值來調(diào)整 pH值。

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當(dāng)發(fā)現(xiàn)回收率下降時，收集該組分，并檢測目標(biāo)化合物是否在這一階段被洗脫。若經(jīng)調(diào)整 pH使可離子化的目標(biāo)化合物中性化，并通過疏水力被 SPE柱吸附，則洗滌時應(yīng)注意保持 pH不變，以免因 pH變化而導(dǎo)致目標(biāo)化合物在洗滌過程中丟失。

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正壓法通常是將帶一定壓力的空氣或氮?dú)鈴?SPE柱上吹走填料中的水；負(fù)壓法則是將一定真空度從萃柱下吹走殘余的水。
單獨(dú)樣品處理，可使用一個通過適配器連接到 SPE柱，NH2固相萃取柱供應(yīng)商，推動樣品或溶劑通過 SPE柱管，如需500 mg或1 g的吸附劑柱床，可選用適配器直接與配合。自動 SPE作業(yè)，由于其優(yōu)良的結(jié)果重復(fù)性，已被廣泛使用；96孔板的 SPE裝置也是一種理想的自動化方案。該方案適用于樣品量大，需要快速處理的場合。

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(在使用這些清潔溶劑之前，清遠(yuǎn)NH2固相萃取柱，可與柱子供應(yīng)商協(xié)商，以確保它們不會對填料造成損害。硅樹脂基質(zhì)中的柱狀物一般都可以用，但是某些洗滌溶劑的配方可能導(dǎo)致有機(jī)聚合物基質(zhì)的填充物膨脹或收縮，從而影響其色譜特性。)此外，確保上表所用的清潔溶劑與以前使用的溶劑可互溶，丙i醇可作為良好的過渡。每一個溶劑系統(tǒng)至少要沖洗20個液柱體積。因為某些溶劑系統(tǒng)粘度較大，應(yīng)相應(yīng)調(diào)整沖洗流速，以確保不超過泵的壓力。在用完胍或脲等溶劑清洗過的柱子上，至少要用40~50柱體積的 HPLC級純水進(jìn)行沖洗。對反相柱來說，不推薦使用十二烷基磺酸鈉(SDS)和 Trition等表面活性劑，因為這些化合物一定會牢固地吸附到硅膠結(jié)合相柱上，因此難以去除。使用表面活性劑可以改變填料的表面性能。但是， SeparationGroup的研究表明：多肽合成過程中產(chǎn)生的保護(hù)基和清除劑對柱體的污染，可通過向流動相中加入500μ L1% SDS溶液，以1 ml/min的速度清除。以5%~95% EBN/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脫后，在平衡起始條件下，柱體的多肽分離功能得以恢復(fù)。

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在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標(biāo)化合物，所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間會產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強(qiáng)，但比離子力更弱。常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。

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