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什么固時候脫水？

激1活平衡溶液，上樣液體無需抽干

其主要目的有兩個，一個是清洗填料，洗去填料內(nèi)部的底面，另一個是促進鍵合分子的展開。在某些長鏈的官能團中，如C18在干燥填料中不能完全展開，而活化可使填料官能團濕潤伸展，使其對目標化合物保持較大吸附活性。因此，激1活平衡過程并不需要進行抽水。

淋巴1結(jié)需抽干主要有兩個原因：

②一般淋洗液與洗脫液的極性差異會很大(如淋洗液為水，洗脫溶劑為正己烷或二氯甲1烷)，兩種溶劑不能互溶或溶解，從而造成洗脫液流不下或流速慢，妨礙洗脫溶劑與目標物接觸，洗脫效果差，NH2固相萃取柱品牌，回收率低。

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所分析的目標化合物必須具有下列一種或多種功能基團，才能通過離子作用力從樣品溶液中分離出來。

(1)可產(chǎn)生陽離子(帶正電荷)的功能(2)可產(chǎn)生陰離子(帶負電荷)的功能

此外，所分析的目標化合物必須在一定 pH條件下才能發(fā)生離子化或中性化反應。為了有效地利用離子交換機理在 SPE柱中吸附目標化合物，需要滿足兩個條件：

目標化合物中的離子與吸附劑基團中的離子態(tài)帶相反電荷；

(2)萃取環(huán)境中的 pH必須使目標化合物和吸附物上的功能基團同時帶電；

(3)萃取環(huán)境中不得含有高濃度的競爭化合物，其電荷與目標化合物相同。

實踐中，為了滿足前兩個條件，以保證99%以上的目標化合物和固相萃取吸附劑表面的官能團可以呈離子型或中性型，應根據(jù)樣品或 SPE柱吸附劑官能團的 pKa值來調(diào)整 pH值。

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當發(fā)現(xiàn)回收率下降時，收集該組分，并檢測目標化合物是否在這一階段被洗脫。若經(jīng)調(diào)整 pH使可離子化的目標化合物中性化，并通過疏水力被 SPE柱吸附，則洗滌時應注意保持 pH不變，以免因 pH變化而導致目標化合物在洗滌過程中丟失。

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正壓法通常是將帶一定壓力的空氣或氮氣從 SPE柱上吹走填料中的水；負壓法則是將一定真空度從萃柱下吹走殘余的水。
單獨樣品處理，可使用一個通過適配器連接到 SPE柱，NH2固相萃取柱供應商，推動樣品或溶劑通過 SPE柱管，如需500 mg或1 g的吸附劑柱床，可選用適配器直接與配合。自動 SPE作業(yè)，由于其優(yōu)良的結(jié)果重復性，已被廣泛使用；96孔板的 SPE裝置也是一種理想的自動化方案。該方案適用于樣品量大，需要快速處理的場合。

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(在使用這些清潔溶劑之前，清遠NH2固相萃取柱，可與柱子供應商協(xié)商，以確保它們不會對填料造成損害。硅樹脂基質(zhì)中的柱狀物一般都可以用，但是某些洗滌溶劑的配方可能導致有機聚合物基質(zhì)的填充物膨脹或收縮，從而影響其色譜特性。)此外，確保上表所用的清潔溶劑與以前使用的溶劑可互溶，丙i醇可作為良好的過渡。每一個溶劑系統(tǒng)至少要沖洗20個液柱體積。因為某些溶劑系統(tǒng)粘度較大，應相應調(diào)整沖洗流速，以確保不超過泵的壓力。在用完胍或脲等溶劑清洗過的柱子上，至少要用40~50柱體積的 HPLC級純水進行沖洗。對反相柱來說，不推薦使用十二烷基磺酸鈉(SDS)和 Trition等表面活性劑，因為這些化合物一定會牢固地吸附到硅膠結(jié)合相柱上，因此難以去除。使用表面活性劑可以改變填料的表面性能。但是， SeparationGroup的研究表明：多肽合成過程中產(chǎn)生的保護基和清除劑對柱體的污染，可通過向流動相中加入500μ L1% SDS溶液，以1 ml/min的速度清除。以5%~95% EBN/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脫后，在平衡起始條件下，柱體的多肽分離功能得以恢復。

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在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強度應逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標化合物，所選的淋洗劑應在不洗脫目標化合物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應能恰巧完全洗脫目標化合物。在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標化合物的極性官能團之間會產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強，但比離子力更弱。常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。

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