在選擇探針類型的同時，還需要選擇標(biāo)記方法。探針的標(biāo)記方法很多，選擇什么標(biāo)記方法主要視個人的習(xí)慣和可利用條件而定。但在選擇標(biāo)記方法時，還應(yīng)考慮實驗的要求，如靈敏度和顯示方法等。一般認(rèn)為放0射性探針比非放0射性探針的靈敏度高。放0射性探針的實際靈敏度不依賴于所采用的標(biāo)記方法，如隨機引物延伸法往往得到比缺口平移法更高的比活性 。在檢測單拷貝基因序列時，應(yīng)選用標(biāo)記效0率0高、顯示靈敏的探針標(biāo)記方法。在對靈敏要求不高時，可采用保存時間長的生物素探針技術(shù)和比較穩(wěn)定的堿性磷酸酶顯示系統(tǒng)。

原位雜交；原位雜交（in situ hybridization）將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進行雜交，稱為原位雜交！

使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置。

以菌落原位雜交為例：對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進行克8隆篩選時，可采用本方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張硝5酸纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時間后，對菌落進行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。

原位雜交中探針的選擇

DNA探針、RNA探針和寡核苷酸探針均能通過不同的酶促分子反應(yīng)進行標(biāo)記。寡核苷酸探針的長度較短，因此避免了探針內(nèi)部退火的問題，在雜交時的滲透能力也更好，原位雜交，探針與靶標(biāo)的接觸這是影響原位雜交是否成功的重要因素之一。DNA探針、RNA探針在合成時需要控制探針片段長度，通常300-1000bp左右，能覆蓋到較長片段的靶核酸序列，增加檢測的靈敏度。

原位雜交-思特進(推薦商家)由武漢思特進科技發(fā)展有限公司提供。武漢思特進科技發(fā)展有限公司位于湖北省武漢市江夏區(qū)高新四路40號葛洲壩。在市場經(jīng)濟的浪潮中拼博和發(fā)展，目前思特進在辦公、文教項目合作中享有良好的聲譽。思特進取得全網(wǎng)商盟認(rèn)證，標(biāo)志著我們的服務(wù)和管理水平達到了一個新的高度。思特進全體員工愿與各界有識之士共同發(fā)展，共創(chuàng)美好未來。