武漢遠(yuǎn)大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研發(fā)、生產(chǎn)為基礎(chǔ)，半胱氨酸鹽酸鹽一水物批發(fā)，以武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院和湖北省氨基酸工程技術(shù)研究中心的成果為依托，為客戶提供的產(chǎn)品。

AtPRMT5是擬南芥中一個(gè)重要的蛋白質(zhì)精氨酸甲0基轉(zhuǎn)移酶，半胱，能夠催化組蛋白和非組蛋白的對(duì)稱性雙甲0基化，半胱氨酸鹽酸鹽一水物廠家，AtPRMT5的缺失會(huì)導(dǎo)致植物生長(zhǎng)發(fā)育的多種缺陷以及大量mRNA前體拼接異常，因此AtPRMT5通過(guò)調(diào)控植物生命周期各個(gè)階段中mRNA前體的正確加工，保證了植物正常的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程。然而，對(duì)于AtPRMT5參與mRNA前體加工的分子機(jī)制的認(rèn)識(shí)還非常有限。

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近日，中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)許超課題組與波蘭華沙大學(xué)Jakub Drozak實(shí)驗(yàn)室合作，解析了SETD3與β-actin多肽的高分辨復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)，并結(jié)合酶活實(shí)驗(yàn)揭示了肌動(dòng)蛋白（Actin）第73位組氨酸（His73）的N3位甲0基化的作用機(jī)制，相關(guān)成果于2月20日以Structural insights into SETD3-mediated histidine methylation on β-actin 為題在線發(fā)表于eLife 雜志。

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天津工業(yè)生物技術(shù)研究所研究員劉君帶領(lǐng)的微生物生理和代謝工程研究組和研究員江會(huì)鋒帶領(lǐng)的新酶設(shè)計(jì)與酵母基因組工程研究組進(jìn)行合作，通過(guò)結(jié)合代謝工程和蛋白質(zhì)工程的方法，系統(tǒng)地改造大腸桿0菌，實(shí)現(xiàn)了OAH的合成。在研究中，首先比較了兩種不同來(lái)源的高絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶(MetX)，然后通過(guò)敲除競(jìng)爭(zhēng)和消耗途徑基因(meta，metB和thrB)并過(guò)表達(dá)合成途徑基因(thrA，生產(chǎn)半胱一水，metxlm)，實(shí)現(xiàn)了OAH的積累，其產(chǎn)量達(dá)到1.68 g/L。為了進(jìn)一步提高OAH的生產(chǎn)，該研究采用多種代謝工程策略對(duì)工程菌株進(jìn)行進(jìn)一步改造，包括：敲除賴氨酸競(jìng)爭(zhēng)途徑基因lysA；利用啟動(dòng)子工程調(diào)控ppc表達(dá)以增強(qiáng)草酰乙0酸的供給；比較不同來(lái)源的天冬氨酸激酶，促進(jìn)前體天冬氨酸的合成等，使OAH的產(chǎn)量提高至4.69 g/L。然而，中間代謝產(chǎn)物高絲氨酸的大量積累說(shuō)明其下游途徑關(guān)鍵酶MetXlm的催化能力是不足的。為了解決這一問(wèn)題，該研究分別采用基于進(jìn)化保守性和基于結(jié)構(gòu)信息的蛋白質(zhì)工程策略對(duì)MetXlm進(jìn)行改造，獲得的突變體酶活比型提高了12.15倍并受到更少的反饋抑制。通過(guò)優(yōu)化表達(dá)MetXlm突變體，使工程菌株OAH產(chǎn)量達(dá)到7.37 g/L。隨后該研究通過(guò)過(guò)表達(dá)胞內(nèi)乙酰CoA合成途徑，調(diào)控胞內(nèi)NADPH的合成，進(jìn)一步提高OAH的合成能力。終獲得的工程菌株OAH-7在7.5 L發(fā)酵罐中經(jīng)60 h發(fā)酵能夠生產(chǎn)62.7 g/L的OAH，是目前報(bào)道的0高水平。

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