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PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
本區(qū)是主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,因此必須注意避免通過(guò)本區(qū)的物品及工作服將擴(kuò)增產(chǎn)物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物時(shí),實(shí)驗(yàn)室設(shè)備儀器廠家,必須使用洗板,廢液必須收集至1 mol/L HCl中,并且不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傾倒,而應(yīng)當(dāng)至遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——標(biāo)本制備區(qū)
由于在樣本混合、核酸純化過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,可通過(guò)在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件,避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則
工作結(jié)束后,必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)當(dāng)可耐受諸如化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)
試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,可以根據(jù)用戶的使用情況和資金的投入選擇。
PCR實(shí)驗(yàn)室布局
實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備器材,只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),實(shí)驗(yàn)室設(shè)備報(bào)價(jià),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動(dòng)。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、Southern轉(zhuǎn)移、核酸測(cè)序方法、質(zhì)譜分析等。
PCR實(shí)驗(yàn)室是分子診斷的基礎(chǔ),也是進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)的必備場(chǎng)所。近些年,分子診斷行業(yè)快速發(fā)展,對(duì)PCR的認(rèn)識(shí)又進(jìn)入到了一個(gè)新的階段,但是基于實(shí)驗(yàn)室的基本知識(shí)仍然是非常重要的一環(huán)。
PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則
不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開(kāi)各工作區(qū)域時(shí),安徽實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,不得將工作服帶出。
PCR實(shí)驗(yàn)室布局
實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長(zhǎng)為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。
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