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PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則
工作結(jié)束后,必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)當(dāng)可耐受諸如化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效。
PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
各區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止氣溶膠擴(kuò)散對(duì)實(shí)驗(yàn)過程造成污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)
貯存試劑和用于標(biāo)本制備的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū),不能經(jīng)過擴(kuò)增檢測(cè)區(qū),試劑盒中的陽性對(duì)照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū),電子實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,應(yīng)當(dāng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——標(biāo)本制備區(qū)
為避免樣本間的交叉污染,加入待測(cè)核酸后,必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對(duì)具有潛在危險(xiǎn)性的材料,必須在生物安全柜內(nèi)開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。
PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功能及主要設(shè)備
擴(kuò)增區(qū):主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——標(biāo)本制備區(qū)
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,可通過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備哪家好,避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室布局
實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動(dòng)。
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA,合肥實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,可看作生物體外的特殊DNA。通過DNA基因追系統(tǒng),能迅速掌握生物體內(nèi)的病毒含量,其精準(zhǔn)度高達(dá)納米級(jí)別。
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