在轉(zhuǎn)染中，DNA通常通過(guò)病毒或非病毒載體(如質(zhì)粒)轉(zhuǎn)運(yùn)到宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒的基本結(jié)構(gòu)包括啟動(dòng)子、復(fù)制起點(diǎn)、多個(gè)克隆位點(diǎn)、目標(biāo)基因和選擇標(biāo)記。質(zhì)粒復(fù)制需要復(fù)制的起源，而多個(gè)克隆位點(diǎn)包含獨(dú)特的內(nèi)切酶切割位點(diǎn)，用于插入外源基因。適當(dāng)?shù)恼婧藛?dòng)子(如CMV或EF-1a)的存在允許外源基因在宿主細(xì)胞中表達(dá)。質(zhì)粒DNA可以以線性和超螺旋DNA的形式轉(zhuǎn)染。與線性DNA相比，使用超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染通常會(huì)產(chǎn)生更高的效率，線性DNA更容易被外切酶降解。然而，線性化的DNA更具重組性，因此可以更容易地整合到宿主基因組中以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染。納米顆粒，由于其在DNA轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞中的保護(hù)能力，在不久的將來(lái)可以用作轉(zhuǎn)基因的非病毒載體。天津轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)惠

脂質(zhì)復(fù)合物(CLNACs)通過(guò)網(wǎng)格蛋白參與的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，并被困在核內(nèi)小體中，從這些囊泡結(jié)構(gòu)中釋放出來(lái)，進(jìn)入核周區(qū)域，***進(jìn)入細(xì)胞核。內(nèi)吞作用在一定程度上取決于脂質(zhì)體載體的物理化學(xué)性質(zhì)。Friend和同事描述了可能由脂質(zhì)體與核膜融合而形成的囊泡和網(wǎng)狀核內(nèi)膜。**近有研究表明，很大一部分從核內(nèi)體釋放到細(xì)胞質(zhì)質(zhì)的質(zhì)粒由于與細(xì)胞質(zhì)中的大離子凝聚劑結(jié)合而失去活性。這可能解釋了脂質(zhì)轉(zhuǎn)染所觀察到的低且可變的轉(zhuǎn)染率。雖然這些脂質(zhì)載體從細(xì)胞外部到細(xì)胞核的路徑尚未完全確定，但核酸能夠產(chǎn)生其效果本身就是一項(xiàng)驚人的壯舉。至少對(duì)于質(zhì)粒而言，較小的結(jié)構(gòu)體比較大的質(zhì)粒具有更高的轉(zhuǎn)染率。核酸外排，雖然不是常見(jiàn)的報(bào)道，但也被證明會(huì)發(fā)生。中國(guó)臺(tái)灣武漢轉(zhuǎn)染試劑選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑可能取決于幾個(gè)因素，包括轉(zhuǎn)染核酸的類(lèi)型和轉(zhuǎn)染的復(fù)雜性(單轉(zhuǎn)染或共轉(zhuǎn)染)。

納米顆粒的主要特性使它們能夠用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染，但似乎找到一種既能改善基因表達(dá)又不影響細(xì)胞、不對(duì)細(xì)胞造成損害的比較好技術(shù)也至關(guān)重要。納米顆粒參與內(nèi)皮運(yùn)輸?shù)哪芰κ蛊淠軌蚓脑O(shè)計(jì)**精確的方法，將基因結(jié)構(gòu)靶向到特定的作用位置。來(lái)自不同化合物和元素的納米顆粒的作用方式與轉(zhuǎn)染的非病毒載體相同，這使它們能夠通過(guò)內(nèi)吞作用將DNA運(yùn)輸過(guò)細(xì)胞膜。DNA被包裹起來(lái)，很容易從核內(nèi)體中釋放出來(lái)，也被核酸酶保護(hù)著不被消化。由于有許多不同種類(lèi)的納米顆粒，找到**適合轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞的納米顆粒是至關(guān)重要的。將納米顆粒與其他化合物連接成多功能、復(fù)雜的運(yùn)輸單元，可以提高穿越細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)男?。將蛋白質(zhì)或多肽結(jié)合到納米顆粒上，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型的不同，轉(zhuǎn)染效率提高了5到10倍。

隨著寡核苷酸生物合成產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，不同類(lèi)型的修飾寡核苷酸也被引入市場(chǎng)，以提高小RNA寡核苷酸轉(zhuǎn)染的效率。其中一種是通過(guò)化學(xué)修飾來(lái)提高其與靶標(biāo)和阻斷外切酶活性的結(jié)合親和力的agomirs和antagomirs。agomir是一種人工修飾的雙鏈miRNA模擬物，旨在發(fā)揮比傳統(tǒng)miRNA模擬物更高的靶標(biāo)抑制活性(krtzfeldt另一方面，antagomir是一種專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的單鏈miRNA類(lèi)似物，旨在抑制特定的miRNA。agomir和antagomir都被認(rèn)為更穩(wěn)定、更有效、更特異，而且與正常的模擬物或拮抗劑相比，對(duì)宿主細(xì)胞膜具有更高的結(jié)合親和力。鎖定核酸(LNA)是另一種修飾的寡核苷酸，其至少一個(gè)核苷酸具有額外的亞甲基橋，以增強(qiáng)其核糖環(huán)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。其鎖定的核糖結(jié)構(gòu)使得LNA比常用的寡核苷酸更短，從而使其比傳統(tǒng)的寡核苷酸表現(xiàn)出更高的效率、穩(wěn)定性和結(jié)合親和力。NA基寡核苷酸的應(yīng)用已被報(bào)道用于各種生化或功能分析，涉及遞送小RNA分子，如siRNA、miRNA和piRNA。一些基于NA基的轉(zhuǎn)染不需要轉(zhuǎn)染試劑，這可以比較大限度地減少轉(zhuǎn)染過(guò)程中試劑的二次效應(yīng)。PEI的分子量對(duì)細(xì)胞毒性和基因轉(zhuǎn)移活性有影響。

基因***是陽(yáng)離子聚合物作為轉(zhuǎn)染劑的主要應(yīng)用。通過(guò)攜帶質(zhì)粒DNA、mRNA和siRNA，陽(yáng)離子聚合物實(shí)現(xiàn)了與***相關(guān)的功能，如基因增強(qiáng)、基因抑制和基因組編輯?；?****直接、或許也是**簡(jiǎn)單的策略是添加新的蛋白質(zhì)編碼基因。在當(dāng)前**背景下，mRNA疫苗的大規(guī)模使用點(diǎn)燃了人們對(duì)核酸藥物的濃厚興趣。理論上，mRNA能夠表達(dá)任何一種蛋白質(zhì);因此，除了作為疫苗預(yù)防傳染病外，它還可以用于***其他疾病。目前的mRNA傳遞技術(shù)是基于脂質(zhì)納米顆粒平臺(tái)，該技術(shù)的**掌握在少數(shù)幾家公司手中。此外，由脂質(zhì)納米顆粒組成的mRNA疫苗應(yīng)在**溫下儲(chǔ)存和運(yùn)輸，這嚴(yán)重限制了疫苗在高溫或條件有限的地區(qū)的使用。因此，陽(yáng)離子聚合物特別適合作為脂質(zhì)體納米顆粒的替代品。影響物理轉(zhuǎn)染或機(jī)械轉(zhuǎn)染效率的因素在很大程度上取決于這些方法的基本原理。中國(guó)臺(tái)灣武漢轉(zhuǎn)染試劑

在腺病毒載體或脂質(zhì)體的全身遞送后，轉(zhuǎn)基因表達(dá)相對(duì)短暫。天津轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)惠

攜帶要轉(zhuǎn)染的特定核酸的載體構(gòu)建可以進(jìn)一步分為病毒載體或質(zhì)粒載體。病毒和質(zhì)粒通過(guò)存在合適的真核啟動(dòng)子促進(jìn)外源轉(zhuǎn)基因的表達(dá)。病毒載體可能在宿主細(xì)胞中觸發(fā)免疫原性反應(yīng)，而非病毒載體的免疫原性相對(duì)較低。需要一種傳遞機(jī)制來(lái)促進(jìn)靶向核酸或載體結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中。其中一些需要物理方法，而另一些涉及使用遞送載體，可能是脂質(zhì)載體或非脂質(zhì)載體，以幫助增強(qiáng)載體載體復(fù)合物與宿主細(xì)胞膜之間的接觸，從而促進(jìn)復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞。設(shè)計(jì)和啟動(dòng)轉(zhuǎn)染試驗(yàn)可能具有挑戰(zhàn)性，特別是可供選擇的轉(zhuǎn)染方法或策略種類(lèi)繁多的情況下。天津轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)惠