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變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時,需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標細菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對營養(yǎng)要求較高的細菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。明膠的凝固點在28℃左右,受運輸過程的溫度及震蕩影響,出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀,此為正?,F(xiàn)象。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂平板
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarbase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點和配制方法:**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測定溶血反應。4.**溶血反應**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時應在通風櫥中進行,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應妥善處理和保存。哥倫比亞瓊脂預裝培養(yǎng)皿KI培養(yǎng)基有上層和下層培養(yǎng)基。上層培養(yǎng)基成分有血消化湯、瓊脂、硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵銨、乳糖和酚紅溶液。
酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學培養(yǎng)基,主要用于鑒定細菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持滲透壓;酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌10-15分鐘。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝試管,每管3ml。5.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時,培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,表明細菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(SN標準),也用于檢測大腸菌群。7.**結(jié)果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說明細菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,說明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲存條件**:避光,密封,陰涼干燥處保存。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點:1.**無血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標微生物的生長,從而提高目標彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細菌的生長提供了必需的營養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會推薦使用,適用于從食品、動物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。海藻糖-脯氨酸培養(yǎng)基被推薦用于稀有放線菌的分離培養(yǎng)基,因為它有助于提高稀有放線菌的出菌率 。
TYCSB培養(yǎng)基基礎(chǔ)(TryptoneYeastCystineSucroseBacitracinMediumbase)是一種用于分離和培養(yǎng)特定細菌的選擇性培養(yǎng)基。它的特點包括:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母膏粉、L-胱氨酸鹽酸鹽、亞硫酸鈉、氯化鈉、無水磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等,瓊脂作為凝固劑。這些成分為細菌提供氮源、碳源、維生素和生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:添加的桿菌肽(Bacitracin)可以抑制革蘭氏陰性菌的生長,有助于選擇性地分離革蘭氏陽性菌,特別是鏈球菌和腸球菌。4.**應用**:主要用于變異鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離和培養(yǎng),也適用于其他鏈球菌和腸球菌的分離。5.**配制方法**:通常稱取培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。6.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進行測試,確保培養(yǎng)基支持目標菌株的生長,同時抑制非目標菌株。7.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應密封保存在陰涼干燥處,配制好的培養(yǎng)基應保存在2-8°C。8.**結(jié)果觀察**:在TYCSB培養(yǎng)基上,可以觀察到細菌的生長情況,用于進一步的鑒定和分析。CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結(jié)晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。擬桿菌瓊脂平板
水瓊脂培養(yǎng)基廣泛應用于微生物學研究的不同領(lǐng)域,包括菌落計數(shù)、分離純培養(yǎng)、鑒定和抗生物質(zhì)敏感性測試等。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂平板
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時,使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細菌的代謝活動導致的。5.**儲存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應避光儲存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應蓋緊瓶蓋注意密封儲存。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂平板
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