在1990年代***使用的綠色熒光蛋白（從水母維多利亞水母克隆）及其衍生物（例如藻紅藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等）是當今生物學研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質粒，但它們的使用有一些缺點，即它可能很耗時，并且在融合時還能夠改變某些細胞蛋白的正常生物學功能。此外，與許多其他熒光團相比，生物熒光團的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當下流行的生物熒光團之一，由238個氨基酸組成，其中三個負責發(fā)出可見綠色熒光的結構。在水母本身中，熒光團與水母發(fā)光蛋白（一種蛋白質）相互作用，當添加鈣時會發(fā)出藍光。通過DNA重組，研究人員可以使用負責產生蛋白質的基因來研究給定的基因和蛋白質。在這里，在將復合物插入細胞之前，該基因與另一個基因（負責產生所需蛋白質的第二個基因）結合。如果細胞產生綠色熒光，研究人員就可以明顯看出該細胞能夠表達目標基因。GFP由488nm激光線激發(fā)，可在510nm處檢測。來自熒光團的微弱信號可以使用抗GFP抗體放大。作為生物標記物，綠色熒光蛋白用于以下功能：監(jiān)測各種生理過程*識別蛋白質定位*檢測轉基因表達DAPI染色液（DAPI Staining Solution）常用于細胞核染色，可將細胞核染成藍色。陜西熒光染料熒光素鉀鹽

為什么要使用熒光染料？雖然不同的染色技術（即考馬斯染色、銀染色、熒光染色）可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質，但使用熒光染料具有其獨特的優(yōu)勢。他們提供：高靈敏度：對于大多數分析物，熒光測量的靈敏度比吸光度測量高1000倍，即使在使用小樣本時也可以令人滿意地達到ppt（萬億分之一）的檢測限。寬線性動態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾：由于吸收光的材料數量眾多，分光光度測量通常會遇到干擾問題。在進行熒光測量時不會遇到這個問題，因為只有少數材料具有熒光能力。高通量：熒光測量具有簡單而強大的協(xié)議，并且可以自動化用于高通量應用。浙江細胞膜熒光染料南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列（效果同Alexa Fluor 系列）。

熒光染料在細胞實驗中具有廣泛的應用1、細胞膜標記：可以使用熒光染料標記細胞膜，以觀察和研究細胞膜的動態(tài)和結構變化。2、染色體和DNA標記：用熒光染料標記染色體或DNA，可以觀察和分析DNA復制、轉錄、修復等過程3、蛋白質標記：通過熒光染料標記蛋白質，可以研究蛋白質的相互作用、定位和運動等特性。4、細胞器標記：使用特定波長的熒光染料可以標記和可視化細胞中的線粒體、溶酶體等細胞器。5、神經科學應用：熒光染料在神經科學中也有廣泛應用，如標記神經元和突觸，觀察神經信號的傳遞等。6、基因表達分析：通過熒光染料標記基因表達產物，可以定量分析基因的表達水平和細胞中的分布情況。

綠色熒光染料ICG的主要作用吲哚菁綠（IndocyanineGreen，簡稱ICG）是一種廣泛應用于醫(yī)學和生物領域的熒光染料。它具有獨特的化學結構和性質，因此被***用于熒光顯像、光熱***、生物識別和藥物輸送等領域。吲哚菁綠的綠色溶解度是其在水中的溶解度，它是衡量該染料在溶液中的溶解能力的重要指標。吲哚菁綠具有較好的水溶性，可以在水中迅速溶解，形成穩(wěn)定的溶液。這一特性使得吲哚菁綠在醫(yī)學診斷和***中得到廣泛應用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學影像學中作為造影劑。由于其具有強烈的熒光特性，能夠在近紅外光譜范圍內吸收和發(fā)射光線，因此被***用于近紅外熒光顯像技術中。在臨床中，醫(yī)生可以通過注射吲哚菁綠溶液，利用近紅外光源對患者進行顯像，以觀察和評估病變部位的血液灌注情況、淋巴引流途徑等。這為醫(yī)生提供了非侵入性、實時性的影像信息，有助于準確診斷和指導***。此外，吲哚菁綠還在光熱***中發(fā)揮著重要作用。光熱***是一種利用光熱效應殺滅腫瘤細胞的方法。吲哚菁綠可以吸收近紅外光并將其轉化為熱能，從而使附近的腫瘤細胞受熱破壞。這項技術在*****中具有巨大潛力，因為它可以實現高度精細的***，同時比較大限度地減少對周圍正常組織的損傷。吲哚菁綠（Indocyanine Green，簡稱ICG）是一種廣泛應用于醫(yī)學和生物領域的熒光染料。

InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料，可使用532nm激光線激發(fā)，并使用TRITC（四甲基羅丹明）濾光片組進行可視化。除了免疫細胞化學應用，Cy3染料通常用于標記核酸。發(fā)光說明：Cy3熒光團也是親脂性神經元和長期DiI細胞追蹤試劑的基礎，該試劑添加烷基尾(≥12個碳）添加到**熒光團上。Cy3染料是用于成像、流式細胞術和基因組應用的蛋白質和核酸結合物的傳統(tǒng)橙色熒光標簽。它也是經典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎。根據化學結構，Cy3可分為普通Cy3（常簡稱Cy3）和磺化Cy3（Sulfo-Cy3）。Cy3水溶性較低，在水相標記反應時常常需要使用有機共溶劑，常用有機溶劑包括DMF，DMSO和乙腈等?；腔疌y3是在Cy3的結構基礎上磺化的產物，附帶2個或3個磺酸根離子。由于磺化效應，磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮，熒光穩(wěn)定性也提高，可賴受更長時間的曝光?；腔疌y3水溶性極高，所以在標記反應中不需要使用有機共溶劑，特別適合標記蛋白等對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性極好，并且染料分子本身帶電荷，標記到蛋白表面后不會引發(fā)疏水性蛋白聚集，提高熒光標記產物的穩(wěn)定性。當然，磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇，DMSO，DMF等有機溶劑，標記反應也可以在純有機溶劑中進行。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。陜西熒光染料熒光素鉀鹽

D-熒光素鉀鹽熒光染料。陜西熒光染料熒光素鉀鹽

1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲存液：儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲存液保存在-20°C，避免反復凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細胞染色（1）懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養(yǎng)細胞2～20分鐘，不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。（3）染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鐘。（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養(yǎng)液。（5）重復（3），（4）步驟兩次以上。 陜西熒光染料熒光素鉀鹽