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Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag 浦斯瑞(上海)生物醫(yī)藥供應(yīng)

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發(fā)布時間:2024-11-07 03:06  

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米顆粒固相核酸富集技術(shù)來純化質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它通常包括高性能納米磁珠和獨(dú)特的緩沖體系組合,通過裂解菌體后釋放的DNA,能夠有效地結(jié)合于磁珠表面,漂洗除雜后獲得高質(zhì)量的目的質(zhì)粒。以下是磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的一些主要特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**快速簡便**:操作步驟簡單,無需多次離心,整個抽提過程通常只需20-25分鐘。2.**高得率和純度**:可以從1-5ml新鮮大腸桿菌菌液中分離純化2-20μg高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA質(zhì)量高,完整性好,OD260/280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/230比值大于2.0。3.**適用性廣**:適用于1-5mL小體積高通量菌液質(zhì)粒抽提,且抽提所得的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等各種下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。4.**自動化兼容**:可整合移液法自動化儀器和磁棒法自動化儀器進(jìn)行高通量提取實(shí)驗(yàn)。5.**安全性高**:操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環(huán)保和安全。6.**成本效益**:相比傳統(tǒng)的離心柱法,磁珠法可以減少離心次數(shù),獲得完整性更好的質(zhì)粒,且操作更為簡便快捷。7.**操作靈活**:磁珠的使用量可靈活調(diào)節(jié),適合不同體積和濃度的樣品處理。Hifair? Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit :適用于從總RNA或mRNA模板合成鏈cDNA,具有高熱穩(wěn)定性。Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag

Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白(SpCas9)是一種用于基因組編輯的核酸酶。它是CRISPR-Cas系統(tǒng)的一部分,該系統(tǒng)是一種細(xì)菌和古菌的適應(yīng)性免疫防御機(jī)制,能夠識別并切割入侵的外源核酸。Cas9蛋白在CRISPR系統(tǒng)中起到關(guān)鍵作用,它能夠識別特定的原間隔子相鄰基序(PAM),在引導(dǎo)RNA(gRNA)的引導(dǎo)下與目標(biāo)DNA結(jié)合并進(jìn)行切割。SpCas9蛋白由1053個氨基酸組成,相對較小的體積使其便于在體內(nèi)遞送,因此它在多種生物中都能進(jìn)行有效的基因組編輯。為了提高SpCas9的表達(dá)量和溶解度,研究人員采用了多種策略,例如使用GB1促溶標(biāo)簽和多重啟動子策略,這些策略可以顯著提高蛋白的產(chǎn)量和活性,同時保持其功能活性不受影響。在基因編輯過程中,SpCas9與gRNA形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物,通過gRNA與基因組DNA的序列匹配來識別目標(biāo)位點(diǎn),并在距離NGGPAM序列3個堿基以內(nèi)的位置切割DNA。為了增強(qiáng)SpCas9的基因組編輯效率,研究人員還開發(fā)了嵌合融合蛋白,例如與5’至3’核酸外切酶重組J(RecJ)或GFP融合的SpyCas9蛋白,這些嵌合蛋白可以顯著提高靶向基因編輯效率,同時保持較低的脫靶效應(yīng)。

Recombinant Human 2B4/CD244/SLAMF4 Protein,hFc TagCRISPR-Cas12a(以前稱為Cpf1)是一種類II型V型內(nèi)切酶,偏好富含胸腺嘧啶的原間隔短回文重復(fù)序列鄰近基序。

Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

PreScissionProtease(PSP)是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。它具有以下特點(diǎn):1.**特異性識別**:PreScissionProtease能在低溫下(4°C)特異識別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進(jìn)行酶切。2.**依賴結(jié)構(gòu)**:底物的識別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級結(jié)構(gòu),還依賴于融合蛋白的二級和三級結(jié)構(gòu)。3.**分離GST標(biāo)簽**:它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達(dá)出的帶有酶底物識別多肽序列融合蛋白的GST標(biāo)簽進(jìn)行分離。4.**表達(dá)宿主**:本品由大腸桿菌中重組表達(dá),并以無菌液體形式提供。5.**物理性質(zhì)**:分子量約為46kDa,物理外觀為無菌無色液體。6.**儲存緩沖液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切緩沖液**:10×酶切緩沖液為500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**純度**:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度大于95%。9.**酶活定義**:在5℃條件下反應(yīng)16小時,能夠切割10μg的GST標(biāo)簽的融合蛋白達(dá)90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。

磁珠法提取的DNA通常指的是通過磁珠吸附技術(shù)從樣本中純化得到的核酸,而基因組DNA(gDNA)是指一個生物體細(xì)胞核中包含的全套遺傳信息的DNA。兩者的主要區(qū)別在于:1.**來源和組成**:-磁珠法提取的DNA可以是基因組DNA,也可以是質(zhì)粒DNA、線粒體DNA等其他類型的DNA。它是一個的概念,指的是通過磁珠法技術(shù)提取的任何類型的DNA。-基因組DNA特指一個生物體細(xì)胞核中的DNA,包含了所有的基因信息,以及可能的非編碼區(qū)域。它通常包含了大量的堿基對,如人類基因組由大約30億個堿基對組成。2.**純度和應(yīng)用**:-磁珠法提取的DNA的純度和質(zhì)量取決于提取過程中的裂解、吸附、洗滌和洗脫步驟,以及磁珠的質(zhì)量和操作條件。高質(zhì)量的磁珠法提取的DNA可以用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如PCR、克隆、測序等。-基因組DNA的提取通常需要考慮其完整性和純度,以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。基因組DNA提取的難點(diǎn)在于血液樣本成分復(fù)雜,且白細(xì)胞體積占比低,因此提取純化難度較高。3.**提取方法**:-磁珠法提取DNA是一種高效、快速的核酸提取技術(shù),它利用磁珠表面修飾的特定官能團(tuán)與核酸的特異性結(jié)合,通過外加磁場實(shí)現(xiàn)核酸與雜質(zhì)的快速分離。FnCas12a包含約1300個氨基酸,含有RuvC-like結(jié)構(gòu)域,同時具有DNA和RNA內(nèi)切酶的活性。

Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中都是常用的酶,但它們之間存在一些關(guān)鍵的不同點(diǎn):1.**來源和熱穩(wěn)定性**:-**TaqDNA聚合酶**來源于嗜熱菌Thermusaquaticus,具有很好的耐熱性,能夠承受PCR的熱變性步驟。-**BstDNA聚合酶**來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus),同樣具有較高的熱穩(wěn)定性,適用于等溫擴(kuò)增,如LAMP技術(shù),無需PCR熱循環(huán)。2.**酶活性**:-**TaqDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'外切酶活性,但沒有3'-5'外切酶活性。這意味著它在DNA合成過程中可以校正一些錯誤,但保真性相對較低。-**BstDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和強(qiáng)鏈置換活性,但缺乏5'-3'外切酶活性。這使得它在等溫擴(kuò)增中更為有效,尤其是在需要高保真度和快速擴(kuò)增的應(yīng)用中。3.**應(yīng)用領(lǐng)域**:-**TaqDNA聚合酶**主要用于PCR技術(shù),適用于各種DNA片段的擴(kuò)增,包括復(fù)雜模板和長片段的擴(kuò)增。-**BstDNA聚合酶**特別適用于等溫擴(kuò)增技術(shù),如LAMP,這些技術(shù)不需要溫度循環(huán),適用于快速、低成本的DNA擴(kuò)增。4.**擴(kuò)增速度和效率**:-**BstDNA聚合酶**在等溫擴(kuò)增中顯示出比傳統(tǒng)TaqDNA聚合酶更快的擴(kuò)增速度和更高的產(chǎn)量,尤其是在優(yōu)化的LAMP反應(yīng)中。

E2酶接收來自E1的激起泛素,并在E3酶的協(xié)助下將泛素分子轉(zhuǎn)移到靶蛋白上。Recombinant Human HPX Protein,His Tag

Probe qPCR Mix (2×) 支持多重qPCR,即在單個反應(yīng)中同時檢測多個靶標(biāo)基因 。Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag

在基因編輯中,除了NLS-Cas9-EGFPNuclease,還有多種技術(shù)可以提高編輯的特異性,這些技術(shù)包括:1.**高保真Cas9變體**:通過工程化改造Cas9蛋白,例如使用SpCas9-HF1或eSpCas9等高保真變體,可以減少脫靶效應(yīng),提高特異性。2.**堿基編輯器(baseEditors)**:這類編輯器可以在不產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂的情況下直接在特定位置進(jìn)行單個堿基的轉(zhuǎn)換,從而減少非目標(biāo)編輯。3.**引導(dǎo)編輯器(PrimeEditors)**:由哈佛大學(xué)劉如謙教授團(tuán)隊(duì)開發(fā)的引導(dǎo)編輯器可以在不依賴DNA雙鏈斷裂和同源定向修復(fù)的情況下,實(shí)現(xiàn)精細(xì)的基因組編輯。4.**CRISPRi和CRISPRa**:這兩種技術(shù)分別用于抑制或激起特定基因的表達(dá),而不切割DNA,從而減少了脫靶風(fēng)險。5.**新型CRISPR系統(tǒng)**:例如CRISPR/Cas12j和CRISPR/CasΦ,這些系統(tǒng)可能具有不同的PAM序列要求和更高的特異性。6.**AI輔助設(shè)計(jì)**:利用人工智能預(yù)測和優(yōu)化sgRNA的設(shè)計(jì),以減少脫靶效應(yīng)。7.**優(yōu)化遞送系統(tǒng)**:改進(jìn)CRISPR組分的遞送方法,例如使用核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物,可以提高編輯效率和特異性。8.轉(zhuǎn)座子編輯系統(tǒng):利用轉(zhuǎn)座子進(jìn)行基因組編輯,可以在不依賴DNA雙鏈斷裂的情況下實(shí)現(xiàn)大片段DNA序列的插入。

Recombinant Mouse CD10/MME Protein,His Tag

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