納米顆粒在疫苗遞送中往往表現(xiàn)出***的佐劑作用。陽離子聚合物，包括PEI、聚賴氨酸、陽離子葡聚糖和陽離子明膠，已經(jīng)有報道顯示出對Th1反應的強烈刺激，其特征是誘導CD4(+)T細胞增殖和th1相關(guān)細胞因子的分泌。此外，陽離子聚合物強烈抑制LPS誘導的巨噬細胞分泌TNF-α。陽離子聚合物的刺激能力與其陽離子化程度有關(guān)，陽離子聚合物與陰離子聚合物的中和可以完全消除刺激作用。聚合物的分子量也會影響其刺激能力，分子越大意味著刺激能力越大。利用外泌體途徑的一種潛在方法是將脂質(zhì)體核酸重新包裝到外泌體中。吉林轉(zhuǎn)染試劑疫苗

化學轉(zhuǎn)染可分為基于脂質(zhì)體或非基于脂質(zhì)體?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑是一種化學物質(zhì)，它能夠形成帶正電的脂質(zhì)聚集體，這些聚集體可以與宿主細胞的磷脂雙分子層順利融合，從而允許外來遺傳物質(zhì)以**小的阻力進入。另一方面，非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑可進一步分為幾類，包括磷酸鈣、樹狀大分子、聚合物、納米顆粒和非脂質(zhì)體。磷酸鈣是轉(zhuǎn)染中使用的低價的化學物質(zhì)之一，轉(zhuǎn)染涉及將帶正電的鈣離子(Ca2+)與帶負電的核酸結(jié)合，形成沉淀，然后被宿主細胞吸收。然而，磷酸鈣轉(zhuǎn)染的成功率較低，需要事先優(yōu)化才能達到較高的轉(zhuǎn)染效率。樹狀大分子是三維的、高度支化的有機大分子，可以與核酸形成復合物，作為一種替代的非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，它優(yōu)于磷酸鈣。然而，使用樹狀大分子的轉(zhuǎn)染效率仍然低于病毒載體和脂質(zhì)體試劑。陽離子聚合物也可以與帶負電荷的核酸形成復合物，這有助于細胞通過內(nèi)吞作用吸收遺傳物質(zhì)。與病毒載體相比，陽離子聚合物產(chǎn)生的細胞毒性較小，但效率也較低。納米顆粒由于其體積小，增強了核酸進入宿主細胞的能力，正在成為非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的替代選擇。吉林轉(zhuǎn)染試劑疫苗南京星葉生物正是利用將核酸封裝在納米級脂質(zhì)體囊泡中的技術(shù)，開發(fā)出了Gemate系列轉(zhuǎn)染試劑。

除了mRNA疫苗，DNA疫苗也是不錯的選擇。在聚葡萄糖、精胺(PG)偶聯(lián)物和第四代聚酰胺樹狀大分子(PAMAM G4)的幫助下，研究人員集中研究了將合成t細胞免疫原作為DNA疫苗使用的方法。他們改進了PG和PAMAM G4復合物的大小、運動性和表面電荷，然后在BALB/c小鼠中測試疫苗設(shè)計的免疫原性。根據(jù)研究結(jié)果，由于同時包裝在PG和PAMAM G4包膜中，DNA疫苗的免疫原性增加。在給予PG包被的DNA疫苗復合物的小鼠中，觀察到**強的t細胞反應，并且這些反應明顯高于給予裸DNA組合和PAMAM 4G包被的DNA組合的動物組。

轉(zhuǎn)染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉(zhuǎn)染效率的潛在因素。Lipofectamine2000試劑與非冷凍對照相比，至少經(jīng)歷一次凍融循環(huán)后，HEK293、Neuro2α、C2C12成肌細胞和肌管、hTERTMSC、SMA和HepG2細胞系的轉(zhuǎn)染效率更高，且細胞活力不受影響。一種可能的解釋是，冷凍解凍可以增強分子重排分散，從而允許更高的分散率，從而允許核酸之間很大程度的接觸，形成更多的轉(zhuǎn)染復合物。然而，還需要更多的研究來支持這一做法，因為凍融過程也被認為會導致再結(jié)晶，從而破壞一些化學物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。納米顆粒的主要特性使它們能夠用于細胞轉(zhuǎn)染。

基于非病毒的轉(zhuǎn)染方法可以進一步分為物理/機械方法和化學方法。常用的物理/機械轉(zhuǎn)染方法包括電穿孔、聲孔、磁***、基因顯微注射和激光照射。電穿孔是一種常用的物理轉(zhuǎn)染方法，利用電壓瞬間增加細胞膜通透性，允許外來核酸進入。這種方法通常用于轉(zhuǎn)染原代細胞、干細胞和B細胞系等難以轉(zhuǎn)染的細胞。然而，使用高壓可能導致細胞壞死、凋亡和長久性細胞損傷。超聲輔助轉(zhuǎn)染或超聲穿孔涉及使用微泡技術(shù)在細胞膜上制造孔，以減輕遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)移，而激光照射輔助轉(zhuǎn)染使用激光束在質(zhì)膜上制造小孔，允許外來遺傳物質(zhì)進入。與電穿孔一樣，超聲穿孔和激光輔助轉(zhuǎn)染也有破壞細胞膜和不可逆細胞死亡的風險。相比之下，磁輔助轉(zhuǎn)染，或使用磁力來幫助轉(zhuǎn)移外來遺傳物質(zhì)的磁轉(zhuǎn)染，似乎對生物的破壞性較盡管效率較低，但對宿主細胞的破壞較小。另一方面，基因顯微注射涉及使用特定的針刺穿細胞，將所需的核酸注射到宿主細胞的細胞核中。然而，這項技術(shù)需要經(jīng)過專門訓練的人員或機器人系統(tǒng)，他們可以高精度地執(zhí)行程序，以防止細胞損傷，因此在基因***等臨床應用中具有重要價值。與物理或機械轉(zhuǎn)染方法相比，化學轉(zhuǎn)染涉及使用專門設(shè)計的化學品或化合物來幫助將外源核酸轉(zhuǎn)移到宿主細胞中。脂質(zhì)復合物又稱陽離子脂質(zhì)-核酸復合物(CLNACs)。安徽轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)惠

一項與抗血管生成基因傳遞高度相關(guān)的發(fā)現(xiàn)是，陽離子脂質(zhì)體（CLs）選擇性地靶向的血管系統(tǒng)。吉林轉(zhuǎn)染試劑疫苗

Severinoetal.進行的研究也指出了陽離子脂質(zhì)作為基因遞送納米載體的潛在毒性。他們成功實現(xiàn)了人動力蛋白的表達，但也證明了較高濃度的SLN仍然具有細胞毒性，并導致活細胞數(shù)量減少。另一組比較了DNA/DOTAP復合物和由魚精蛋白、DNA和脂質(zhì)層組成的納米顆粒在不同細胞系上的轉(zhuǎn)染效率:CHO(中國倉鼠卵巢細胞)、HEK293(人胚胎腎細胞)、NIH3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)和A17(小鼠*細胞)。魚精蛋白/DNA/脂質(zhì)納米顆粒在每種細胞系中更有效地實現(xiàn)綠色和紅色熒光蛋白的表達，即使不同細胞系對轉(zhuǎn)染的敏感性不同。陽離子脂質(zhì)的毒性作用使我們必須尋找另一種能夠取代它們的化合物。不同的β-氨基酯聚合物作為納米載體，成功地將hESC(人類胚胎干細胞)的轉(zhuǎn)染效率提高了四倍，同時保持較低的細胞毒性。這給我們帶來了希望，納米顆粒能夠與具有所需官能團的其他化合物的必要添加一起形成***有效的核酸遞送平臺。吉林轉(zhuǎn)染試劑疫苗