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使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
半固體儲存培養(yǎng)基是一種在微生物學(xué)研究和細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域中扮演重要角色的培養(yǎng)基。它主要用于觀察微生物的動力、菌種的保藏與運(yùn)輸、厭氧菌的培養(yǎng)、菌種鑒定、細(xì)胞培養(yǎng)、噬菌體效價測定以及微生物趨化性研究等。半固體培養(yǎng)基通常由液體培養(yǎng)基加入少量凝固劑制成,例如瓊脂的用量在0.2~0.7%之間。在具體應(yīng)用上,半固體培養(yǎng)基可以用于以下方面:1.**微生物動力觀察**:通過推測細(xì)菌是否有鞭毛來進(jìn)行鑒定。2.**菌種保藏與運(yùn)輸**:便于菌種的短時間保存和長途運(yùn)輸。3.**厭氧菌培養(yǎng)**:適用于厭氧菌的培養(yǎng),對于研究厭氧微生物的生長和代謝至關(guān)重要。4.**菌種鑒定**:通過觀察菌落的形態(tài)和生長特性來區(qū)分不同的微生物種類。5.**細(xì)胞培養(yǎng)**:在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,半固體培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞、細(xì)胞克隆、細(xì)胞表達(dá)和細(xì)胞毒性等實(shí)驗(yàn)。6.**噬菌體效價測定**:用于雙層平板法測定噬菌體的效價,是研究病毒與宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趨化性研究**:幫助研究微生物的趨化性,即微生物對化學(xué)物質(zhì)的定向移動反應(yīng)。DCLS瓊脂平板PK瓊脂培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿中。
濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于分離和計數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計數(shù)。**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,疊氮化鈉作為抑菌劑抑制非腸球菌生長,TTC作為顯色劑使腸球菌菌落呈現(xiàn)紅色。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:適用于水和污水中腸球菌的檢測,也可用于食品樣本中腸球菌的分離和計數(shù)。4.**配制方法**:稱取培養(yǎng)基42g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至45-50℃時傾入無菌平皿,備用。無需高壓滅菌。5.**結(jié)果觀察**:腸球菌在濾膜腸球菌瓊脂上通常形成紅色菌落,便于識別和計數(shù)。濾膜腸球菌瓊脂因其高選擇性和特異性,是檢測水和食品樣本中腸球菌污染的重要工具。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**無血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì)。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標(biāo)微生物的生長,從而提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細(xì)菌的生長提供了必需的營養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應(yīng)用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會推薦使用,適用于從食品、動物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。GC肉湯基礎(chǔ)用于致病性奈瑟氏菌的分離,每100ml添加IsoVitaleX添加劑、V-C-N抑菌劑、無菌血紅蛋白粉各1支 。
葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(DextroseBroth)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,它主要含有蛋白胨、牛肉膏粉、氯化鈉和葡萄糖等成分。這種培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。**特點(diǎn)介紹**:1.**營養(yǎng)成分**:葡萄糖肉湯培養(yǎng)基含有的蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子,氯化鈉維持滲透壓,而葡萄糖則提供碳源。2.**應(yīng)用范圍**:它適用于營養(yǎng)要求高的細(xì)菌培養(yǎng),特別是用于一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢測和腸桿菌科細(xì)菌的葡萄糖產(chǎn)氣試驗(yàn)。3.**制備方法**:一般操作是稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱攪拌煮沸至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。4.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,可以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。例如,乙型溶血性鏈球菌ATCC21059在該培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長,而大腸埃希氏菌ATCC25922則用于測試培養(yǎng)基的特異性。葡萄糖肉湯培養(yǎng)基因其營養(yǎng)均衡和制備簡單,被用于微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌的分離、鑒定和培養(yǎng)研究。水瓊脂培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究的不同領(lǐng)域,包括菌落計數(shù)、分離純培養(yǎng)、鑒定和抗生物質(zhì)敏感性測試等。改良Camp-BAP瓊脂平板
哥倫比亞肉湯的pH值通??刂圃?.3至7.5之間,為微生物生長提供適宜的酸堿環(huán)境 。亞硫酸鐵瓊脂培養(yǎng)皿
嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一種專門用于滅菌與消毒鑒定試驗(yàn)的微生物培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn)和用途:1.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和瓊脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可發(fā)酵的糖類,作為碳源;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值為7.1±0.2(25℃),為嗜熱脂肪桿菌的生長提供了適宜的環(huán)境。3.**用途**:主要用于滅菌與消毒鑒定試驗(yàn),通過觀察嗜熱脂肪桿菌在該培養(yǎng)基上的生長情況來判斷滅菌和消毒的效果。4.**使用方法**:稱取35g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,然后在115℃下高壓滅菌30分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用嗜熱脂肪桿菌ATCC7953作為質(zhì)控菌株,培養(yǎng)條件為56±1℃,24小時,生長率應(yīng)達(dá)到PR≥0.7,表現(xiàn)為生長良好。6.**儲存條件與保質(zhì)期**:貯存于避光、干燥處,未開封的保質(zhì)期為三年。7.**注意事項(xiàng)**:在稱量時應(yīng)注意防塵,佩戴口罩操作以避免呼吸道不適;使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊;質(zhì)檢報告可以登錄相關(guān)網(wǎng)站下載。亞硫酸鐵瓊脂培養(yǎng)皿
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