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溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)是一種用于微生物學研究的培養(yǎng)基,特別是在鑒定某些細菌對溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,這些成分為細菌的生長提供碳源、氮源、維生素和生長因子。此外,還需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一種能夠水解細菌細胞壁的酶,主要用于檢測細菌對溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃),以保證細菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝于燒瓶中,每瓶99ml,高壓滅菌后冷卻至50℃左右時,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混勻后分裝無菌試管,每管2.5ml,備用。5.**用途**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗,如GB4789.14-2014標準所述。它可以用來鑒定細菌是否能夠在溶菌酶存在的情況下生長,從而幫助鑒別不同的細菌種類。6.**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶營養(yǎng)肉湯中。水瓊脂培養(yǎng)基的凝膠結(jié)構(gòu)在不同溫度下可能會發(fā)生變化,因此需要根據(jù)微生物的特性調(diào)控培養(yǎng)溫度。NA頭孢菌素酶平板
改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)是一種用于微生物學研究和診斷的培養(yǎng)基,它具有一些特定的特點和用途:1.**選擇性分離培養(yǎng)基**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)主要用于李斯特氏菌的選擇性分離。它通過添加特定的抗生物質(zhì)或化學物質(zhì),抑制其他非目標微生物的生長,從而促進目標微生物——在這種情況下是李斯特氏菌的生長。2.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括酪胨、多價胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、甘氨酸、氯化鋰和瓊脂等。這些成分為微生物提供了生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境。3.**pH值**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),這為李斯特氏菌的生長提供了適宜的酸堿環(huán)境。4.**添加物**:在使用時,每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復(fù)達欣,這些添加物有助于抑制其他微生物的生長,提高李斯特氏菌分離的選擇性。5.**高壓滅菌**:在制備過程中,需要將培養(yǎng)基加熱至完全溶解,然后進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保培養(yǎng)基的無菌性。6.**冷卻和添加抗生物質(zhì)**:滅菌后,培養(yǎng)基需要冷卻至50℃,然后在無菌環(huán)境下加入抗生物質(zhì),備用。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
GC肉湯培養(yǎng)基(GCBrothMedium),也稱為胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基,是一種加富培養(yǎng)基,通常用于培養(yǎng)營養(yǎng)需求較高的微生物,特別是那些難以培養(yǎng)的細菌。以下是GC肉湯培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:-ProteosePeptone(胰蛋白胨):15.0g-CornStarch(玉米淀粉):1.0g-DipotassiumPhosphate(磷酸氫二鉀):4.0g-MonopotassiumPhosphate(磷酸二氫鉀):1.0g-SodiumChloride(氯化鈉):5.0g-DIWater(蒸餾水):500ml-將pH值調(diào)節(jié)至7.2+/-0.22.**配制方法**:-將上述成分溶解在蒸餾水中,加熱使培養(yǎng)基完全溶解。-將溶液在121°C下高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50°C,然后加入無菌的2%血紅蛋白溶液和其他添加劑。-混合均勻后,分配到培養(yǎng)容器中。3.**用途**:-作為致病菌的富集培養(yǎng)基。-用于配制血液培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基。-用于無菌試驗,檢測好氧菌污染。-在醫(yī)學上,常用來培養(yǎng)從臨床樣品中分離的致病微生物。-用于藥敏試驗和紙片擴散法試驗。4.**保存條件**:-密封,2-25°C保存。5.**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。GC肉湯培養(yǎng)基因其營養(yǎng)豐富,適用于多種微生物的生長,包括好氧菌、厭氧菌。它在微生物學研究和醫(yī)學診斷中有著廣泛的應(yīng)用。PK瓊脂培養(yǎng)基可能含有特定的選擇性添加劑,以促進某些微生物的生長,同時抑制其他不需要的微生物。
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對李斯特氏菌的生長有影響。李斯特氏菌的適生長pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長并表現(xiàn)出其特有的生物學特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對微生物生長至關(guān)重要,因為它可以影響:1.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細胞膜功能**:pH值的變化可能會干擾細胞膜的完整性和功能,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會抑制李斯特氏菌的生長,或者導(dǎo)致其他非目標微生物過度生長,影響結(jié)果的準確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實驗室人員需要仔細控制和監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落總數(shù)和需氧芽孢總數(shù)的測定,對于確保乳制品的質(zhì)量和安全至關(guān)重要 。溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板
盡管哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)有許多優(yōu)點,但也存在一定的局限性,如對嗜血桿菌生長的抑制以及受血液類型的影響。NA頭孢菌素酶平板
M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一種用于微生物檢測的培養(yǎng)基,主要用于水中大腸菌群的膜過濾法檢測。以下是它的一些特點和配制方法:1.**配方**:M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基的配方包含胰胨、蛋白胨、酵母浸粉、乳糖、氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸十二烷基鈉、去氧膽酸鈉和亞硫酸鈉等成分,以及作為指示劑的堿性品紅。2.**配制方法**:通常稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的無水乙醇和蒸餾水,加熱至沸騰以幫助溶解。配制好的培養(yǎng)基通常需要在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:這種培養(yǎng)基專門用于檢測飲用水、廢水、乳制品和食品中的大腸菌群,是執(zhí)行標準方法的一部分,如美國公共衛(wèi)生協(xié)會(APHA)所推薦的方法。4.**貯藏條件**:配制好的培養(yǎng)基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性。5.**結(jié)果觀察**:在M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基上,乳糖發(fā)酵型的大腸桿菌和大腸菌群會產(chǎn)生紅色至深紅色的菌落,帶有金色金屬光澤,而非乳糖發(fā)酵型微生物則產(chǎn)生無色透明菌落。6.**產(chǎn)品規(guī)格**:M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基通常以250g/瓶的規(guī)格出售,并且有較長的保存期限,一般為3年。7.**注意事項**:在配制和使用過程中,應(yīng)避免攝入、吸入和皮膚接觸,以確保操作安全。NA頭孢菌素酶平板
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