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細菌固體分離培養(yǎng)基是用于分離和培養(yǎng)細菌的固體培養(yǎng)基,通常包含瓊脂作為凝固劑。這種培養(yǎng)基能夠為細菌提供穩(wěn)定的生長環(huán)境,并有助于觀察微生物的菌落特征。以下是細菌固體分離培養(yǎng)基的一些關鍵特點:1.**成分**:細菌固體分離培養(yǎng)基通常包含蛋白質(zhì)來源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、無機鹽(如氯化鈉)和瓊脂等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值對細菌的生長至關重要,通常需要調(diào)節(jié)至適宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**滅菌**:培養(yǎng)基在制備過程中需要進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘。4.**用途**:主要用于細菌的分離、計數(shù)和鑒定。通過稀釋倒平板法、涂布平板法或平板劃線法等技術,可以從混合的微生物群體中分離出單一的細菌菌落。5.**保存**:培養(yǎng)基通常在室溫、避光、干燥的條件下保存。6.**操作**:在無菌條件下操作,避免污染。使用時,將培養(yǎng)基加熱至液態(tài),然后倒入無菌培養(yǎng)皿中,冷卻凝固后即可用于接種細菌。7.**菌落特征**:不同種類的細菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落具有特定的形態(tài)特征,如大小、形狀、顏色、邊緣等,這些特征可以用于細菌的鑒定。PYG培養(yǎng)基的干粉應在避光、干燥處保存,未開封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊 。乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂平板
Leeming-Notman培養(yǎng)基(LN培養(yǎng)基)是一種用于培養(yǎng)馬拉色菌屬(Malassezia)的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的配方包含多種營養(yǎng)成分,能夠促進馬拉色菌的生長。以下是Leeming-Notman培養(yǎng)基的一些關鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨(Bacteriologicalpeptone):10.0g-葡萄糖(Glucose):10.0g-酵母膏粉(Yeastextract):2.0g-牛膽鹽(Oxbile,desiccated):8.0g-單硬脂酸甘油酯(Glycerolmonostearate):0.5g-吐溫60(Tween60):5.0mL-橄欖油(Oliveoil):20mL-瓊脂(Agar):15g-去離子水(Deionizedwater):1.0L-pH值調(diào)整至5.6±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至指定范圍。-進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃后,無菌加入添加劑。3.**用途**:-主要用于培養(yǎng)馬拉色菌屬的菌,這些菌與人類皮膚有共生關系,并且在醫(yī)學研究中具有重要意義。4.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期通常為兩年。5.**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。-配制過程中應在無菌條件下操作。
營養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實驗室進行微生物培養(yǎng)使用。營養(yǎng)瓊脂是一種基礎培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學測試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應儲存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應在20-30°C的環(huán)境中儲存。
改良R2A瓊脂(ModifiedR2Amedium)是一種應用的低營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于微生物的分離、計數(shù)和鑒定,特別是在水質(zhì)檢測中用于測定細菌總數(shù)。以下是改良R2A瓊脂的一些關鍵特點和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氫二鉀-無水硫酸鎂-酸鈉-瓊脂2.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于純化水中菌落總數(shù)的測定。-適用于EP(歐洲藥典)、USP(美國藥典)、ChP(中國藥典)標準。4.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍。-進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。5.**保存條件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事項**:-在稱量和操作過程中應注意無菌操作,避免微生物污染。-使用后應立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。7.**應用**:-在微生物學研究、醫(yī)學診斷、食品檢測和環(huán)境保護等領域有廣的應用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:質(zhì)控菌株接種后于30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時,用于評估培養(yǎng)基的性能。改良R2A瓊脂因其營養(yǎng)豐富、操作簡便和應用廣,成為實驗室中常用的培養(yǎng)基之一。巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。
胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎是一種用于微生物學實驗的培養(yǎng)基,主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試實驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:TSSB基礎的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化鈉、無水磷酸氫二鉀、葡萄糖和瓊脂等。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化鈉5.0克、無水磷酸氫二鉀2.5克、葡萄糖2.5克和瓊脂12.0克。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加脫纖維羊血使用,以提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。5.**檢驗原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培養(yǎng)基中作為營養(yǎng)物質(zhì)提供菌體生長所需的碳源、氮源、維生素及礦質(zhì)元素等;無水磷酸二氫鈉作為pH緩沖體系;瓊脂作為凝固劑;脫纖維羊血提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。6.**用法**:稱取本品42.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃時,加入5-10ml無菌脫纖維羊血,混勻后傾注平板,備用。7.**質(zhì)量控制和典型特征**:在30-32℃培養(yǎng)18-24小時,蠟樣芽孢桿菌典型特征為在菌落周圍呈現(xiàn)β型完全溶血的溶血環(huán)。PK瓊脂培養(yǎng)基可能含有特定的選擇性添加劑,以促進某些微生物的生長,同時抑制其他不需要的微生物。Brewer厭氧菌瓊脂預裝培養(yǎng)皿
改良配方提高了培養(yǎng)基對特定微生物的選擇性,有助于特定菌株的檢測和鑒定。乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂平板
PALCAM瓊脂基礎是一種專門設計用于分離和培養(yǎng)單核細胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來分離其他類型的細菌,盡管其選擇性成分主要針對李斯特氏菌。**特點**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,特別是非李斯特氏菌的生長。4.**應用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時,會水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長,利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
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