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分光分度計的組成部分
儀器組成
分光光度計已經成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。
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分光光度計的工作原理
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分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
分光光度計的技術參數(shù)
波長范圍:320∽1000nm
光譜帶寬:4nm
雜散光:≤0.5%(在360nm處)
波長準確度:優(yōu)于±2nm
透射比準確度:≤±1nmT