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為了滿足越來越復(fù)雜樣品的高l效、快速分離和分析的需求,硅膠色譜填料的制備技術(shù)在不斷進(jìn)步和。從早形貌不規(guī)則的無定形硅膠發(fā)展到球型硅膠;從粒徑分布寬的多分散球型硅膠發(fā)展到粒徑高度均一的單分散球型硅膠;從全多孔球型硅膠發(fā)展到表面多孔核殼結(jié)構(gòu)硅膠;從金屬雜質(zhì)含量高的A型硅膠發(fā)展到超純的B型硅膠;從不耐堿的純硅膠基質(zhì)發(fā)展到耐堿的有機(jī)雜化硅膠;從相對單一的鍵合相到更加多樣化的鍵合相硅膠色譜填料。每一次硅膠材料制備技術(shù)的進(jìn)步都促進(jìn)了硅膠色譜分離分析性能的進(jìn)一步提升,并拓展其應(yīng)用范圍。
反相色譜是比較常用的色譜分離模式,占到了全部分析色譜的70%左右。通常只需優(yōu)化流動相組成就可實(shí)現(xiàn)對大多數(shù)有機(jī)化合物和多肽的分離分析。反相硅膠色譜填料的制備方法比較簡單,主要是通過硅膠表面羥基與帶不同烷l基鏈或試劑鍵合。其中C4、C8和C18 硅膠鍵合相是使用比較廣泛的反相色譜填料。反相色譜填料的研究是朝著柱效高、重現(xiàn)性好、分析速度快、制備方法簡單、硅羥基掩蔽完全、選擇性好、pH使用范圍寬、壽命長等目標(biāo)進(jìn)行。反相硅膠色譜填料發(fā)展主要是兩方面:一方面是制備越來越豐富的鍵合相以滿足HPLC 越來越廣的分離選擇性的要求;另外一方面是解決反相色譜填料表面殘留硅羥基帶來拖尾、pH適用范圍受限、及使用壽命短等問題。反相色譜填料制備的過程中, 由于位阻原因,硅膠表面的硅羥基不可能全部與試劑反應(yīng),殘留的硅羥基在反相分離過程中會與極性分子形成非特異性吸附,導(dǎo)致l極性化合物尤其是堿性化合物色譜峰變寬,甚至嚴(yán)重拖尾,柱效下降等。另外殘留硅羥基還會影響硅膠色譜填料的耐酸堿性,并限制其pH使用范圍,縮短填料使用壽命。因此開發(fā)有效封尾(封端)技術(shù)以減少或消除殘留硅羥基從而改善反相色譜填料性能是色譜填料研究的重要方向之一。另外在封端過程中引進(jìn)帶正電荷的功能基團(tuán)也可以屏蔽硅羥基對堿性化合物非特異吸附。
從第三代單分散硅膠色譜填料的精準(zhǔn)制造技術(shù)的突破及產(chǎn)業(yè)化,到胰島素精純的反相硅膠色譜填料的成功產(chǎn)業(yè)化,再到手性色譜填料,再到體積排阻的填料產(chǎn)業(yè)化成功,這些看似不可能的奇跡被納微科技一個接一個地創(chuàng)造,導(dǎo)致國外色譜公司及很多人都很好奇納微科技是如何做到的。其實(shí)納微并沒有什么神奇力量,有的只是比別人多一些耐心,多一些堅持。每一項(xiàng)重大技術(shù)的突破都是納微長期堅持的結(jié)果,很多技術(shù)都需要花上十多年的研發(fā)才獲得成功??深A(yù)期,隨著單分散色譜填料精準(zhǔn)制備技術(shù)的進(jìn)一步完善、品種增多,并在單分散硅膠基質(zhì)上實(shí)現(xiàn)各種功能化,就象球形硅膠替代無定型硅膠成為現(xiàn)代HPLC主流色譜填料不可避免一樣;單分散色譜填料替代多分散色譜填料成為未來色譜填料的主流也是必然的發(fā)展趨勢。這一次色譜新材料的變革和新材料產(chǎn)業(yè)化技術(shù)突破中國公司不再缺位,而且是在引l領(lǐng)。