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液相色譜法
液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用液相色譜法分析測定,因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中,可用氣相色譜分析的約占20% ,而80% 則需用液相色譜來分析。HPLC因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點且不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、及臨床分析,己將該法收載于藥典。
液相色譜
自動進樣器
樣品在進樣前必須經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)先處理,需要經(jīng)過亞微米濾膜的過濾或者離心,防止樣品中的微小顆粒堵塞管路,好使用流動相作為溶劑配制樣品,所用溶劑應(yīng)該對樣品有較好的溶解性。
針座是喇叭口朝上暴露在空氣中的,有時空氣中的較大灰塵顆??赡芮『寐湓卺樧牧髀穬?nèi)而引起針座的堵塞。這時候可以嘗試卸下針座,將它接在泵的出口上反沖,一般能解決問題。
如果經(jīng)常使用緩沖溶液,除了泵頭之外,ALS計量泵的柱塞及密封圈,六通閥的轉(zhuǎn)子密封圈和定子密封圈應(yīng)該定期清洗,防止有鹽的顆粒磨損ALS一定要使用Agilent的樣品瓶及瓶蓋;使用不兼容的或者加工精度差的樣品瓶及瓶蓋會引起ALS故障率的增加及性能的降低。
液相色譜的主要部件有哪些?
液相色譜的部件按流動相流路的順序:
流動相→真空脫氣機(在線脫氣裝置)→泵(二元泵和四元泵:區(qū)分,有幾種流動相按一定比例混合)→進樣器(手動和自動)→柱溫箱→檢測器(紫外:朗伯-比爾定律,質(zhì)譜:荷質(zhì)比,熒光:躍遷,elsd:蒸發(fā)光)
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液相色譜常見問題
在日常工作中,遇見液相色譜儀哪些異常情況?又是如何解決的?
峰的問題:峰前沿,峰重疊,峰拖尾,鬼峰,基線漂移。
壓力問題:超壓,低壓,壓力波動。
硬件問題:日常損耗,零件損壞。