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有些植物種類在試管中難以生根,或有根但與莖的維管束不相通,或根與莖聯(lián)系差,或有根而無根毛,或吸收功能極弱,移栽后不易成活,這就需要采用試管外生根法。從形成的嫩莖上切取插條進(jìn)行試管外生根是一項(xiàng)降低成本的有效措施,它不但減少了試管生根而需要無菌操作的工時(shí)耗費(fèi),也減少了一次培養(yǎng)基制作的材料及能源消費(fèi)。組培苗剛好解決了這一難題,通過人工干預(yù)的方式,能快速培育出成熟苗。切割下的插穗可用生長素類或適當(dāng)?shù)娜芤航禾幚?,所用濃度?yīng)當(dāng)預(yù)先小批量試驗(yàn)確定。
中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室:組培的標(biāo)準(zhǔn)化操作
1、培養(yǎng)基制備室用75%酒精噴霧降塵,紫外燈照射20分鐘。
2、瓊脂溶解后,加入各種元素(大量元素、微量元素、有機(jī)物和鐵鹽)和,加熱到沸騰后停止加熱,定容。
3、加入抑菌劑,調(diào)PH,分裝到培養(yǎng)瓶,封口時(shí)間不超20min。(建議及時(shí)封口保證成功率)
4、若用培養(yǎng)瓶作為培養(yǎng)容器,為了降低污染,可以高壓滅菌,滅菌方法同傳統(tǒng)方式,只是滅菌時(shí)間由原來的15min~20min,降到10min,也可以只對培養(yǎng)瓶進(jìn)行滅菌使用,裝入培養(yǎng)基后就不許再滅菌。若用一次性塑料杯,PE保鮮膜封口可以不經(jīng)過高壓滅菌。人們對中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室要求,不僅僅局限于過去常規(guī)的無性繁殖手段和傳統(tǒng)的植物育種方法。
5、接種室用75%酒精噴霧降塵,紫外燈照射30分鐘,用75%酒精將接種臺面和手擦拭,打開瓶蓋,用已滅菌的接種工具,把外植體接種到培養(yǎng)基上,然后封口。
6、培養(yǎng)室要保持干凈,可以經(jīng)常用潔爾滅處理。生根階段,可以在溫室內(nèi)培養(yǎng),如果溫室條件好,培養(yǎng)條件控制設(shè)施齊全,整個(gè)過程都可以在溫室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。
中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)
采用莖尖或葉片培養(yǎng)的方法可以除去絕大數(shù)植物的病毒、真菌和細(xì)菌,使植株生長勢強(qiáng)、花朵增大、色澤鮮艷、抗逆能力提高、產(chǎn)花數(shù)量增加。按取材→接種→培養(yǎng)→生根→移栽流程,可實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn),這一技術(shù)在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用被稱為是農(nóng)業(yè)上的一次“革命”,對反季節(jié)生產(chǎn)有著特殊作用。還有生長以及分化,外植體材料是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基礎(chǔ)上,經(jīng)過30d的培養(yǎng)后,每塊莖尖均萌發(fā)出不定芽,講不定芽,將不定芽進(jìn)行分切,轉(zhuǎn)移到增值培養(yǎng)基礎(chǔ)上繼代。
中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室移栽前準(zhǔn)備
(1)生根培養(yǎng)基
生根培養(yǎng)基用 1/2MS 糖 20 g/L 的培養(yǎng)基,將要移栽的組培苗轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基中暗處理 24 h,然后轉(zhuǎn)到正常培養(yǎng)箱中培養(yǎng),生根(約 20 天左右)后即可準(zhǔn)備下地移栽。
(2)組培苗鍛煉
從培養(yǎng)室移出的組培苗在移苗前需要進(jìn)行一段時(shí)間的鍛煉。將要下地的組培苗瓶口膜解開,并將組培苗從培養(yǎng)箱中移出放在常溫室內(nèi),避免強(qiáng)光直射,2-3 天后洗根栽植。
(3)組培苗根部清洗
準(zhǔn)備一盆溫清水,用鑷子將組培苗輕輕揀出,放入溫水中清洗,注意不能用自來水沖洗組培苗,容易傷到根部。
如何給中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行疏枝和拉枝
在中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室中干上疏枝,可先疏去離地面50cm以內(nèi)的萌生枝,再疏去與中干夾角小、基部較粗、且嚴(yán)重影響風(fēng)、光的枝,保留在自然生長條件下由側(cè)芽萌發(fā)而形成的夾角大、基粗較細(xì)、長度短的主枝,當(dāng)樹高超過標(biāo)準(zhǔn)時(shí),及時(shí)落頭,控制樹高。在主枝上疏枝,可疏去與主枝夾角?。ㄐ∮?0°)、基部較粗、影響主枝生長的枝,保留與主枝角度大、生長勢中庸的枝,當(dāng)中干的主枝與主枝上的枝在同一方向發(fā)生重疊時(shí),應(yīng)疏去主枝上的枝而不能疏去中干上的枝,當(dāng)中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室主枝長度大于行距的1/2時(shí),及時(shí)回縮,控制先端生長勢,穩(wěn)定樹冠大小。中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室移栽前準(zhǔn)備(1)生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基用1/2MS 糖20g/L的培養(yǎng)基,將要移栽的組培苗轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基中暗處理24h,然后轉(zhuǎn)到正常培養(yǎng)箱中培養(yǎng),生根(約20天左右)后即可準(zhǔn)備下地移栽。
甩放可用于中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室中干和主枝,對中干連年甩放,頂芽每年自然向上生長,而中干上的側(cè)芽萌發(fā)后會形成數(shù)量多、夾角大、基部細(xì)、生長適中的枝;在F14上培養(yǎng)的植株形態(tài)更接近于露地栽培的甜櫻桃形態(tài),葉形正常。對主枝延長頭連年甩放,頂芽自然向前生長的同時(shí),主枝中后部的各年生枝段上的芽子萌發(fā)后會形成數(shù)量多、基部細(xì)、生長適中的各類中、短枝及葉叢枝或結(jié)果后抽生的果臺副梢;對中庸枝和果臺副梢甩放,會形成結(jié)果部位相對穩(wěn)定、生長適中的單軸延伸結(jié)果枝組。
中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室帶頭從傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)型升級
說起中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室快速繁殖技術(shù)通俗的講,只需利用一個(gè)植物細(xì)胞,就可成倍式優(yōu)良品種及珍貴物種,面對國家現(xiàn)有的岌岌可危、頻臨的植物資源,中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室是不可或缺的一項(xiàng)技術(shù)力量,例如:華蓋木、、等名貴植物及頻危植物,采取一個(gè)優(yōu)良細(xì)胞,放入營養(yǎng)基內(nèi),待種苗長出,優(yōu)良性狀完全一樣,不會出現(xiàn)植物資源面臨的現(xiàn)象,通過快繁技術(shù)培育的種苗,長勢一致,移栽成活率高,抗病性強(qiáng)。(2)組培苗鍛煉從培養(yǎng)室移出的組培苗在移苗前需要進(jìn)行一段時(shí)間的鍛煉。
利用這項(xiàng)快繁技術(shù)體系系統(tǒng),改變傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)快繁方式,中藥材組培苗實(shí)驗(yàn)室速度可提高3-5倍,育苗時(shí)間更靈活,不受自然環(huán)境及換季限制,完全采用人工控制處理的恒溫環(huán)境,有效增長率達(dá)到85%以上,實(shí)現(xiàn)龍頭帶動(dòng)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)型,以科技力量為主導(dǎo),搶占市場先鋒,促成現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)發(fā)展方向。4、細(xì)胞培養(yǎng)指以單個(gè)游離細(xì)胞(如用果酸酶從組織中分離的體細(xì)胞,或花粉細(xì)胞,卵細(xì)胞)為接種體的離體無菌培養(yǎng)。