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山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟南。公司是集化學科研、開發(fā)、生產、銷售、服務為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進的生產設備,完善的產品檢測手段和質量保證體系。生產方法亮藍的制備由鄰磺基苯jia醛與N-乙ji-N-(3-磺基芐基)-苯an縮合,再經重鉻suan鈉或二氧化鉛氧化,反應結束后用純堿堿化,再用氯化鈉進行鹽析得粗品。我公司的員工具有較強的責任感。經過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。公司本著“誠信經營、專注品質”的宗旨,參與到激烈的市場競爭中來,以好的產品質量,優(yōu)惠的產品價格,令人滿意的銷售服務,贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠信、實力和產品質量獲得業(yè)界的認可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導和業(yè)務洽談。
?本考馬斯亮藍染色試劑盒(Commassie?Blue?Staining?Kit)采用了經典的考馬斯亮藍染色和脫色方法,以考馬斯亮藍R250為染料,可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色,或Western轉膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。測蛋白用的考馬斯亮藍配方稱取考馬氏亮藍G250(注意不是R250)50mg,加95%乙醇25ml溶解,加85%磷酸50ml,H2O定容到500ml,過濾去除少量未溶解物。?
???使用本試劑盒,采用常規(guī)染色脫色方法累計時間達到2-3小時后可以觀察到蛋白條帶;采用快速染色脫色方法20分鐘左右即可觀察到蛋白條帶。觀察到清晰的蛋白條帶則需染色脫色更長時間。?
???本試劑盒中的染色液和脫色液經過改良,不含有毒的jia醇,但含有刺激性氣味的yi酸。
山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟南。公司是集化學科研、開發(fā)、生產、銷售、服務為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進的生產設備,完善的產品檢測手段和質量保證體系。經過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。我公司的員工具有較強的責任感。經過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。公司本著“誠信經營、專注品質”的宗旨,參與到激烈的市場競爭中來,以好的產品質量,優(yōu)惠的產品價格,令人滿意的銷售服務,贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠信、實力和產品質量獲得業(yè)界的認可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導和業(yè)務洽談。
考馬斯亮藍染色?使用說明:
? 1.?常規(guī)染色脫色方法:
? a.?電泳結束后,取凝膠放入適量考馬斯亮藍染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
?b.?置于水平搖床或側擺搖床上緩慢搖動,室溫染色1小時或更長時間。? 注:具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時間宜適當延長。高濃度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、硫酸銨和去污劑時測定有干擾。凝膠較薄,溫度較高,則染色時間可以適當縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時,可以認為已染色充分。染色2-4個小時或更長時間不會對終的染色效果產生fu面影響。?
c.?倒出染色液。染色液可以回收重復使用至少2-3次。
? d.?加入適量考馬斯亮藍染色脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
? e.?置于水平搖床或側擺搖床上緩慢搖動,室溫脫色4-24小時。期間更換脫色液2-4次,直至藍色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達到預期。對于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。通常蛋白條帶在脫色1-2小時后即可出現(xiàn)。? 注:脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時間過長也會導致蛋白條帶的顏色變淺。
? f.?完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保? 存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。?
2.?快速染色脫色方法:?
a.?電泳結束后,取膠放入適量考馬斯亮藍染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對于膠濃度大于10%的膠比較堅韌,在發(fā)生煮沸時不易破損;對于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。
?b.?隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫搖床上搖動5-10分鐘。
? d.?加入適量考馬斯亮藍染色脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
? e.?微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。
? f.?隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動5-10分鐘。此時通??梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。
? g.?更換新鮮的脫色液,重復步驟e和步驟f,直至藍色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達到預期。?