蛋白質(zhì)晶體板制作

設(shè)計(jì)并制作了一種在微腔中對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行微批量法(microbatch)結(jié)晶的碟式微流控結(jié)晶芯片,它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級(jí))、操作簡(jiǎn)便的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選方法,這種芯片能成功地結(jié)晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統(tǒng)地比較這種微流控芯片與傳統(tǒng)的使用蒸汽擴(kuò)散法的24孔結(jié)晶板的結(jié)晶能力,用3個(gè)Hampton結(jié)晶試劑盒,在4℃及20℃培養(yǎng)條件下分別對(duì)5種標(biāo)準(zhǔn)蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖異構(gòu)酶(glucose isomerase)和嗜熱菌蛋白酶(thermolysin))進(jìn)行了結(jié)晶篩選實(shí)驗(yàn).結(jié)果表明,在4℃時(shí)微流控芯片與24孔結(jié)晶板有相近數(shù)目的結(jié)晶條件(91 vs 98)。

蛋白結(jié)晶板使用

主要表現(xiàn)在2個(gè)方面:一是在傳統(tǒng)結(jié)晶方法和試劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一系列新的的結(jié)晶技術(shù)和篩選試劑盒;二是從生物學(xué),物理學(xué)和化學(xué)等角度提出的一些提高結(jié)晶篩選效率的新技術(shù),主要包括通過(guò)分子工程改造蛋白,提高蛋白溶液的穩(wěn)定和均一性,導(dǎo)入籽晶,共結(jié)晶,改善結(jié)晶界面和變溫篩選等技術(shù).展望了該領(lǐng)域未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)。

蛋白質(zhì)晶體板介紹

蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)，對(duì)蛋白質(zhì)晶體用X射線衍射法解出蛋白質(zhì)分子中各原子排列的三維結(jié)構(gòu)。在晶體中各蛋白質(zhì)分子以有序的晶胞形式重復(fù)排列，其形成受蛋白質(zhì)的純度和濃度、pH值、溫度、沉淀劑等影響。由于遺傳工程、同步輻射裝置、探測(cè)和分析技術(shù)、結(jié)晶自動(dòng)化等技術(shù)的飛躍進(jìn)步，已獲得的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)從初“蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)”

目前,仿生合成是制備純文石的有效方法之一,它是依據(jù)生物礦化原理,以有機(jī)物的組裝體為模板制備出具有的結(jié)構(gòu)及優(yōu)異的物理和化學(xué)性能的無(wú)機(jī)材料。本文利用生物礦化原理,在常溫常壓下以新型蛋白質(zhì),即竹蟶韌帶纖維狀蛋白質(zhì)層為基底,采用氣體擴(kuò)散法,通過(guò)氯化鈣溶液和二氧化碳反應(yīng)制備了納米文石晶體且具有梭狀,捆狀,球狀,花狀,狀和板片狀超結(jié)構(gòu)。