酶底物法測定總大腸菌群的影響因素

培養(yǎng)溫度

總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測培養(yǎng)溫度需嚴(yán)格控制在35～37℃，培養(yǎng)溫度過高或過低均使檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。

培養(yǎng)時間

總大腸菌群培養(yǎng)16～20 h 的檢測結(jié)果與24 h相比均有顯著性差異( p＜0.05)，培養(yǎng)22、28 與 24 h 結(jié)果差異不顯著( p＞0.05)；而大腸埃希氏菌培養(yǎng) 16 ～22 h 的檢測結(jié)果與 24 h 相比均有顯著性差異( p＜0.05)，培養(yǎng)28 h與24 h結(jié)果無顯著性差異( p＞0.05)。此方法對總大腸菌群的檢測培養(yǎng)時間在 22～28h之間可以得到準(zhǔn)確結(jié)果，而大腸埃希氏菌的檢測則需24～28h；無論振蕩培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)對培養(yǎng)結(jié)果基本沒有影響。

酶底物在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域指參與生物化學(xué)反應(yīng)的化學(xué)物質(zhì)，能為化學(xué)元素成分、分子結(jié)構(gòu)或化合物，經(jīng)酶作用可形成產(chǎn)物。

產(chǎn)品特性：

1.酶底物法檢驗試劑，定量檢驗盤/定量孔，定量瓶出廠前均已殺菌，用戶能夠 直接安心使用。

2.酶底物法檢驗試劑是我司研發(fā)并符合GB/T57750.12-2006的酶底物法固定底物技術(shù),培養(yǎng)液，假陽性和假陰性均好于傳統(tǒng)方式。

3.酶底物法檢驗試劑經(jīng)大量用戶實驗室使用和驗證，說明與傳統(tǒng)方式多管發(fā)酵法和濾紙法具備方式統(tǒng)一性和對比性。

大腸桿菌檢測方法

生化鑒定

生化鑒定常用三糖鐵瓊脂（TSIA）和KIA/MIU(AA -/ -）和IMVC（ --）來初步鑒定。Z后鑒定依據(jù)全方面生化反應(yīng)，典型的大腸埃希菌的基本生化反應(yīng)特征：TSIA（雙糖鐵）產(chǎn)酸/產(chǎn)氣，產(chǎn)氣、CIT（枸櫞酸鹽）陰性、URE（脲酶）陰性、IDN陽性、MOT（動力） /-、ORN（鳥氨酸） /-。

分子生物學(xué)檢測

致瀉性大腸桿菌是Z早應(yīng)用分子診斷法的一類致病菌。事實上，分子生物學(xué)方法是糞便菌群中致瀉性大腸桿菌不同類型間相互間區(qū)分以及它們與非致病性大腸桿菌之間相區(qū)分的Z普遍、可靠的技術(shù)。目前對致瀉性大腸桿菌的分子生物學(xué)檢測研究，在核酸探針技術(shù)和PCR法兩個方面已經(jīng)獲得了重大進展。