12h膠凍樣類芽孢桿菌的斜面,無菌操作涂片

方法

（1）取培養(yǎng)12 h膠凍樣類芽孢桿菌的斜面，無菌操作涂片，經(jīng)革蘭氏染色后觀察其菌體形態(tài)；同時在斜面中加入一定量的無菌水，涂布于檢測培養(yǎng)基上，于32 ℃倒置培養(yǎng)36 h，觀察其菌落形態(tài)。

（2）從發(fā)酵終點的膠凍樣類芽孢桿菌發(fā)酵液中吸取5.0 mL于45.0 mL無菌水中，按1:10進行梯度稀釋，每個樣品取3個連續(xù)適宜的稀釋度，用0.5 mL無菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL，均勻地涂布于檢測培養(yǎng)基平板上；近年來，關于復合微生物肥料的應用日趨廣泛，特別是復合微生物肥料迅速崛起，這將使我國肥料行業(yè)進入一個嶄新時代。每一稀釋度重復3次，同時以無菌水作空白對照，于32 ℃培養(yǎng)48 h，以出現(xiàn)20～300個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標準，統(tǒng)計有效活菌數(shù)。

微生物菌肥發(fā)揮作用的方式

巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌是目前我國菌肥生產(chǎn)的主要。由試驗可知，微生物菌肥發(fā)揮作用的方式主要是提高土壤中可吸收鉀與磷的含量，將無效鉀、磷轉(zhuǎn)變?yōu)橛行р洝⒘?，供植物吸收。如果土壤中原本沒有鉀、磷元素，菌肥也不可能產(chǎn)生這些元素，即菌肥不能代替氮、磷、鉀肥料，只能提高土壤肥料的利用率和肥效。實際上土壤中鉀的總含量并不缺乏，只是鉀供應不足，研究和開發(fā)利用解鉀微生物，闡明其作用機理是微生物肥料研究和應用中的一個重要課題。使用菌肥后，仍需要施用常規(guī)肥料，才能保證作物的營養(yǎng)需求。

促成作物增產(chǎn)的另一因素是微生物發(fā)酵過程中所生成的植物，通過作用，作物根系活力增強，光合作用效率提高，使作物獲得充分的營養(yǎng)成分，終提高產(chǎn)量。要使這些功能更好地發(fā)揮，施加于土壤中的微生物必需成活。因施加于土壤中的總菌數(shù)一般為75000億個/公頃，總菌重約為7.5g。在土壤中微不足道，如不大量繁殖，則不能產(chǎn)生明顯效能。而要保證菌能在土壤中存活、生長和繁殖，則土壤中必須有供給菌生長繁殖所需的營養(yǎng)成分，如糖類、有機氨等。進料速率對HB-02菌株噴霧干燥芽孢收率的影響試驗證實：進料速率0。在有機質(zhì)較豐富的土壤中，該菌的效能將發(fā)揮得更好。

枯草芽孢桿菌在飼料添加中的應用功效

1、維持腸道生態(tài)平衡

促進腸道有益生長，降低大腸桿菌、弧菌、桿狀病菌數(shù)量，增強抗應激能力，減少疾病發(fā)生。

2、促進生長

可產(chǎn)生有機酸、多種酶（淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等）、B族維生素，吸收，提高飼料轉(zhuǎn)化率。

3、調(diào)節(jié)

刺激動物生長發(fā)育，增強抗病力，提高成活率，可替代或減少使用，防止耐藥菌的產(chǎn)生。

4、優(yōu)化養(yǎng)殖環(huán)境

分解動物殘渣，降解糞漿，消除臭味；降低舍內(nèi)有害氣體濃度，減少病原菌的排放，顯著凈化水質(zhì)環(huán)境。

膠凍樣類芽孢桿菌固氮能力的研究認可不一

固氮功能

目前對于膠凍樣類芽孢桿菌固氮能力的研究認可不一，并且在分子水平上缺乏理論支持。

但是，膠凍樣類芽孢桿菌能夠固氮的直接證據(jù)為該類細菌可在完全無氮的培養(yǎng)基上生長良好，并且不適應高氮培養(yǎng)生長條件。

促生抗病功能

國內(nèi)外學者在對膠凍樣類芽孢桿菌的研究中發(fā)現(xiàn)，此種細菌有刺激作物生長（分泌）和抑制作物病害作用，有的菌株能產(chǎn)生，甚至不止一種，能限制多種病原菌如致病性鐮刀菌、腐霉菌、立枯絲核菌所引起的許多病害。

吸附功能

膠凍樣類芽孢桿菌因多糖產(chǎn)量較高，具有較強的吸附能力，且具有無毒性、污染小、pH適用范圍寬以及絮凝效果好和成本低等特點，其作為絮凝劑在重金屬廢水處理等領域顯示了較大的潛力。這些多糖類絮凝物質(zhì)與蛋白質(zhì)類、糖蛋白類或核酸類的微生物絮凝劑相比具有更高的熱穩(wěn)定性。00t/h時，單位時間內(nèi)單位料液水分的蒸發(fā)量降低，霧滴變大，導致無法完全干燥霧滴，樣品的含水量較高，容易堵塞噴頭，掛壁現(xiàn)象嚴重，影響了產(chǎn)品的集粉率。