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武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;結(jié)果86例患者中有68例FISH檢測結(jié)果為陽性,剩余18例FISH檢測為陰性的患者中有10例為小于5mm的Ta期淺表。公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
mFISH是在熒光原位雜交基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新技術(shù),它不僅具有FISH的優(yōu)點,而且克服了FISH的許多局限,其特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區(qū)分間期細胞多倍體和超二倍體等。用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂,在3個以上的不對稱位置作標記。mFISH用激發(fā)光譜和吸收光譜不同的熒光索按一定調(diào)色方法標記不同的探針,從而對不同靶DNA同時進行定位和分析,并能對不同探針在染色體上的位置進行排序。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。顯色以下各步均在室溫下進行。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。
(1)緩沖液I洗1min。
(2)用含2%正常羊和0.3%TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。
(3)用含1%正常羊和0.3%TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。
(4)將稀釋液滴加在切片上,封口膜覆蓋,濕盒內(nèi)4℃孵育過夜。
(5)緩沖液I洗10min。
(6)緩沖液Ⅱ洗10min。
(7)加顯色液,封口膜覆蓋,避光室溫孵育2~20h,隨時鏡檢,當顯色滿意時入緩沖液Ⅲ終止顯色。
顯色液臨用前配,其配方為:①NBT 45μl;②X-Phospllate液 35μl;③左旋咪唑 2.4mg;④緩沖液Ⅱ 加至10ml。
(8)常規(guī)脫水、透明、封固。
結(jié)果:雜交陽性信號為紫藍色顆粒。