PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案

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6、應(yīng)配備足夠的固定電源插座，避免多臺(tái)設(shè)備使用共同的電源插座。應(yīng)有可靠的接地系統(tǒng)，應(yīng)在關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)安裝漏電保護(hù)裝置或監(jiān)測(cè)報(bào)警裝置。

7、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)(桌)柜和座椅等應(yīng)穩(wěn)固和堅(jiān)固，邊角應(yīng)圓滑。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水，并能耐受熱、酸堿、消毒劑及其他化學(xué)劑。一般采用環(huán)氧樹(shù)脂臺(tái)面。

8、實(shí)驗(yàn)臺(tái)中的櫥柜和實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)牢固，實(shí)驗(yàn)臺(tái)、柜和其他設(shè)備之間應(yīng)保持一定距離，以便清潔。

9、實(shí)驗(yàn)室門(mén)為凈化門(mén)，應(yīng)有可視窗并帶自動(dòng)閉門(mén)器，實(shí)驗(yàn)室的門(mén)與門(mén)不能相對(duì)開(kāi)啟，必須錯(cuò)位開(kāi)啟。并達(dá)到適當(dāng)?shù)姆阑鸬燃?jí)，門(mén)鎖及門(mén)的開(kāi)啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生。

10、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)洗手池，水龍頭開(kāi)關(guān)宜為非手動(dòng)式，宜設(shè)置在靠近出口處。

11、給水管道應(yīng)設(shè)置倒流防止器或其他有效的防止回流的裝置；給排水系統(tǒng)應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計(jì)。

12、應(yīng)配備適用的應(yīng)急器材，如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。

13、應(yīng)配備適用的通訊設(shè)備。

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防止實(shí)驗(yàn)污染都有哪些措施？

對(duì)于低流行地區(qū)，PCR檢測(cè)人員經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)上崗后，核酸污染的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小，但在疫區(qū)超負(fù)荷工作時(shí)，就可能會(huì)遇到核酸污染的問(wèn)題，可通過(guò)以下措施降低污染機(jī)會(huì)：

1.正確佩戴手套：手套未緊密貼合拇指、食指和中指，在進(jìn)行開(kāi)蓋操作時(shí)容易發(fā)生交叉污染。

2.正確使用生物安全柜：簡(jiǎn)單、整潔、避免通風(fēng)口堵塞；操作前后紫外線照射，消毒劑隨手可及；廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液，并且及時(shí)清理廢液缸，保證廢物不超過(guò)廢液缸體積的2/3。

3.核酸提取儀去污染：每天多批次檢測(cè)時(shí)，在每一批次檢測(cè)完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對(duì)儀器進(jìn)行去污染。

4.重視通風(fēng)：不定期對(duì)房間進(jìn)行通風(fēng)，每次至少持續(xù)30min。

5.PCR擴(kuò)增區(qū)去污染：PCR反應(yīng)管必須蓋緊，避免擴(kuò)增后的核酸對(duì)環(huán)境的污染。

6.實(shí)驗(yàn)室隨手可及的消毒劑。

PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果中有曲線出現(xiàn)末尾起跳但是沒(méi)有完整擴(kuò)增的現(xiàn)象。

原因分析：

（1）陰參曲線末尾起跳，通常表示存在污染；

（2）復(fù)檢樣本，排除非特異性擴(kuò)增的可能性；

（3）正常樣本也可存在曲線末尾起跳，表示樣本濃度低或者加樣量不準(zhǔn)確。

解決方案：排除是否存在污染；排除污染原因后復(fù)檢樣本，如果復(fù)檢后曲線為陰性直線則說(shuō)明之前的末尾起跳為非特異性擴(kuò)增，如果復(fù)檢后曲線仍與之致則說(shuō)明末尾起跳表示該樣本中待檢病毒核酸的濃度偏低。

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PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)裝修經(jīng)驗(yàn)補(bǔ)充

①試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；可以通過(guò)控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。

②核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過(guò)控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。

③在理想情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制，要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到一定的，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

④如果使用熒光PCR儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。若房間進(jìn)深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比走廊更有意義。