核酸試劑盒

TwistAmp? exo 試劑盒為用戶提供了一個exo試劑盒，加上用于實時熒光檢測的引物探針及陽性模板，該模板可與每次檢測反應配合使用。

TwistGlow? 沙門氏菌（即用型，可用于實時熒光檢測）和 TwistFlow? 沙門氏菌（即用型，可用于終點側(cè)流檢測）試劑盒均為用戶提供包含靶基因及內(nèi)部質(zhì)控引物探針反應組分、一個兩步走的細胞裂解樣本制備方法，以及可與每次試劑盒反應配合使用的模板。

RPA技術主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非?？?/span>，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。RPA擴增的基礎體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑，我們只要準備好引物和模板就行。擴增結(jié)果可以通過凝膠電泳進行終點檢測，產(chǎn)物純化后可用于下游研究。

在這個基礎體系中添入不同的酶和探針，就可以實現(xiàn)多樣化的RPA應用。舉例來說，TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術和核酸外切酶III，能實現(xiàn)數(shù)據(jù)的實時讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過反應終點的擴增子總量有所減少，適合獲得強熒光信號進行動力學分析，不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來，可以一步實現(xiàn)RNA模板的實時擴增。

等溫核酸試劑盒

目前疑似病例與確診病例已逾6萬例，核酸檢測需求量與日俱增。另外，湖北省增加“臨床診斷”分類，將疑似病例標準放寬，需要更多保質(zhì)保量的核酸檢測產(chǎn)品投入應用。國家審核批準的新型冠狀病毒核酸檢測產(chǎn)品大多采取的是“實時熒光RT-PCR檢測”方法，RT-PCR需要核酸提取、擴增2個步驟完成，但目前市面上部分注冊產(chǎn)品僅有擴增產(chǎn)品，沒有核酸提取產(chǎn)品，缺乏系統(tǒng)的核酸檢測方案，無法保證核酸檢測的系統(tǒng)性、準確性及可靠性，也間接造成了核酸檢測遭到社會公眾質(zhì)疑的尷尬局面。因此，當檢測產(chǎn)品投入后，可能還需匹配不同廠家的核酸提取試劑，對抗疫工作的開展產(chǎn)生了一定影響。