等溫核酸試劑盒

據(jù)介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產(chǎn)物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監(jiān)控，甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內(nèi)。不過，經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產(chǎn)物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應(yīng)。

什么是RPA?

概念:

重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，適宜反應(yīng)溫度在37°C左右。

“一般來說，核酸檢測是目前準(zhǔn)確的診斷方法?！庇腥烁嬖V記者，核酸檢測試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個方面有關(guān)。一是樣品沒有采集到。這一點很容易理解。例如，咽拭子采樣時人比較難受，深度不夠可能會采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。

另一個假陰性的原因是核酸檢測試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動，特別是定量的不造成檢測的不準(zhǔn)確。換句話說，由于這一次各家核酸檢測試劑盒供應(yīng)商都是臨時啟動，有些準(zhǔn)備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導(dǎo)致在生產(chǎn)過程中不進行定位，或是酶活性不足，或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等，都可能造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

由新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）引起的新冠（COVID-19）正在世界范圍內(nèi)大規(guī)模蔓延，威脅著的公共衛(wèi)生系統(tǒng)和人類的生命健康。目前，由于缺乏有效的措施，因此盡可能多的篩選有癥狀或無癥狀者并找到他們的接觸范圍是預(yù)防新冠疫情傳播的有效方式。逆轉(zhuǎn)錄-實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR），因其高的靈敏度和特異性，是目前新冠檢測的金標(biāo)準(zhǔn)方法。但是該方法對實驗室環(huán)境、檢測儀器、以及操作人員要求相對較高，因此不利于推廣到需要現(xiàn)場即時檢測（POCT）的地方，尤其是在欠發(fā)達國家或資源匱乏的地區(qū)。