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等溫核酸試劑盒
TwisAmp Liquid Exo說(shuō)明
以靈活的液體形態(tài)進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光 RNA 擴(kuò)增。若想要將 RPA 與 TwistDx 熒光 TwistAmp? exo 探針結(jié)合使用,則推薦使用本產(chǎn)品。除了基本的組分,還包含強(qiáng)大的核酸酶(核酸外切酶 III),該酶將在擴(kuò)增反應(yīng)期間處理 TwistAmp? exo 探針并產(chǎn)生實(shí)時(shí)讀出。用戶只需提供引物、探針、dNTP 和模板。
非常適用于:實(shí)時(shí)熒光 DNA 檢測(cè),便于使用不同的 RPA 反應(yīng)體積或改變組分比例
Product code: TALQEXO01
RNA試劑盒使用方法
使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價(jià)較高,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大,對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有必要購(gòu)買,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長(zhǎng)的問(wèn)題(如果碰上國(guó)內(nèi)無(wú)貨的時(shí)候,要從國(guó)外發(fā)貨,會(huì)等很長(zhǎng)一段時(shí)間)。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國(guó)產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯(cuò),還可以。
當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯(cuò),如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。
基本檢測(cè)原理是首先將待檢產(chǎn)物和兩種檢測(cè)物混合,特異性結(jié)合后形成帶有兩種標(biāo)記(生物素和FITC)的復(fù)合物;隨后將該復(fù)合物滴加到試紙條的加樣區(qū),與加樣區(qū)的膠體金顆粒結(jié)合,新形成的復(fù)合物在層析膜擴(kuò)散作用下擴(kuò)散至檢測(cè)線,只有標(biāo)記有生物素的復(fù)合物會(huì)被生物素配體捕獲,從而使檢測(cè)線“顯色”,而未結(jié)合檢測(cè)物的膠體金顆粒會(huì)繼續(xù)擴(kuò)散至質(zhì)控線并捕獲進(jìn)而使質(zhì)控線“顯色”。
數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù),是一種核酸分子定量的檢測(cè)方法?,F(xiàn)階段,核酸分子的定量有三種方法:光度法基于核酸分子的吸光度來(lái)定量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR基于Ct值,即指可以檢測(cè)到熒光值對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR作為新定量技術(shù),主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,借助專門設(shè)備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬(wàn)個(gè)液滴分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,單一液滴為獨(dú)立反應(yīng)單元,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。