等溫核酸試劑盒

RNA試劑盒使用方法

使用時一定要根據自己的實驗需要購買提取試劑盒， 如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質量以及完整性，會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護分析等后續(xù)實驗的結果。

當前提取效果好的是QIANGEN公司生產的RNA提取試劑盒，但其售價較高，單次實驗費用花費太大，對精度要求不高的實驗沒有必要購買，當然還有其它的進口試劑盒，但是均存在價格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內無貨的時候，要從國外發(fā)貨，會等很長一段時間）。普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現(xiàn)貨，如天根（目前國內生產的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，還可以。

當然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好，其實采用一些經典的RNA提取方法，效果也很不錯，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經典的方法操作復雜一些。

什么是RPA?

概念:

重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，適宜反應溫度在37°C左右。

核酸試劑盒

TwistAmp? exo 試劑盒為用戶提供了一個exo試劑盒，加上用于實時熒光檢測的引物探針及陽性模板，該模板可與每次檢測反應配合使用。

TwistGlow? 沙門氏菌（即用型，可用于實時熒光檢測）和 TwistFlow? 沙門氏菌（即用型，可用于終點側流檢測）試劑盒均為用戶提供包含靶基因及內部質控引物探針反應組分、一個兩步走的細胞裂解樣本制備方法，以及可與每次試劑盒反應配合使用的模板。

RPA反應的適宜溫度在37℃~42℃之間，無需變性，常溫下即可反應，大大加快了PCR的速度。并且由于不需要溫控設備，RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸（尤其是DNA）模板擴增到可檢出水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產物。無需復雜樣品處理，即可實地檢測；既可擴增DNA也可擴增RNA，省去額外的cDNA合成步驟；檢測方式多樣：終點檢測、對擴增過程進行實時監(jiān)控或通過側流層析試紙條（LFD）讀取結果。

試劑盒包括兩類：①.TwistAmp凍干研發(fā)試劑盒（包括TwistAmp Basic試劑盒、TwistAmp exo 試劑盒和TwistAmp nfo 試劑盒共三種）；②. TwistAmp液態(tài)研發(fā)試劑盒（包括TwistAmp Liquid Basic 試劑盒和TwistAmp Liquid exo 試劑盒共兩種）

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