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PCR實驗室布局
不同功能的工作區(qū)應是分隔獨立的,各工作區(qū)有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開。
PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結(jié)構(gòu)應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
PCR實驗室注意事項
幾個區(qū)域的大小設置情況,試劑準備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū),空間可以相對小一些,樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。
PCR實驗室工作基本原則
由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關(guān)鍵,因此可使用可移動紫外燈(254nm波長),在工作完成后調(diào)至實驗臺上60~90cm內(nèi)照射。
PCR實驗室注意事項——標本制備區(qū)
為避免樣本間的交叉污染,加入待測核酸后,必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在危險性的材料,必須在生物安全柜內(nèi)開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。
PCR實驗室注意事項——擴增區(qū)
為避免氣溶膠所致的污染,應當盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。必須注意的是,所有經(jīng)過檢測的反應管不得在此區(qū)域打開。
PCR實驗室各區(qū)功能及主要設備
擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要設備加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。
PCR實驗室通風系統(tǒng)及壓力控制
各區(qū)域之間應具備單向的實驗工藝流、物流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。
PCR實驗室注意事項——標本制備區(qū)
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,可通過在本區(qū)內(nèi)設立正壓條件,避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。