組成編輯完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：(1)已包被抗原或的固相載體(吸附劑)；(2)酶標(biāo)記的抗原或(結(jié)合物)；(3)酶的底物；(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制(定量測定中)；(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；(7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。



ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM，這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性和樣品中的其它成份。



制備方法編輯包括以下步驟：1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選；2)抗原的制備；3)的采集；4)間接ELISA方法的建立；5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證；6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證；7)對屠宰場進(jìn)行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出豬的戊型病毒，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預(yù)防、控制豬戊毒的流行和阻斷戊毒由豬向人傳播。



加酶標(biāo)：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ ”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。