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原位雜交電話

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發(fā)布時間:2020-12-01 06:47  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末被發(fā)明,現(xiàn)已從實驗室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。





原位雜交技術(shù)因其高度的靈敏性和準(zhǔn)確性而日益受到許多科研工作者的歡迎,并廣泛應(yīng)用到基因定位、和基因圖譜的構(gòu)建等研究領(lǐng)域。此外,原位雜交技術(shù)做為染色體高分辨顯帶技術(shù)的補(bǔ)充和發(fā)展,在水生物的細(xì)胞遺傳學(xué)的研究領(lǐng)域?qū)l(fā)揮更重要的作用。目前原位雜交技術(shù)在植物中的應(yīng)用比較廣泛,例如在棉花、麥類和樹木等的遺傳育種方面取得了顯著的成就,在畜牧上原位雜交技術(shù)主要用于基因定位和基因圖譜的構(gòu)建以及轉(zhuǎn)基因的檢測和等方面。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。原位雜交技術(shù)(Insituhybridization,ISH)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù),始于20世紀(jì)60年代。





結(jié)果 86例患者中有68例FISH檢測結(jié)果為陽性,剩余18例FISH檢測為陰性的患者中有10例為小于5mm的Ta期淺表。雜交與顯色雜交將已標(biāo)記的探針加入預(yù)雜交液即成為雜交液(探針濃度為1μg/m1),切片經(jīng)2×SSC短暫浸洗后,滴加雜交液,于濕盒內(nèi)置37℃或42℃孵育過夜。與病理學(xué)檢查結(jié)果比較,FISH檢測的特異性為100%,敏感性為87%。FISH檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)T1及T2期細(xì)胞染色體異常數(shù)目明顯高于Ta期膀胱(P<0.05),但在T1及T2期膀胱間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 FISH檢測具有敏感性高、特異性強(qiáng)、無創(chuàng)傷等優(yōu)點,在初步診斷及監(jiān)測方面具有較好的臨床應(yīng)用前景,有可能成為簡便、有效的初篩指標(biāo)之一。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。




FISH選用的標(biāo)本既可以是分裂細(xì)胞也可以是間期細(xì)胞。近年來,隨著FISH所應(yīng)用的探針種類的不斷增多,如DAPI /GFP/FITC/PI/Texas-Red等,使得普通的寬場熒光顯微鏡即可獲得高質(zhì)量的FISH信號。RNA原位雜交技術(shù)經(jīng)不斷改進(jìn),其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠(yuǎn)超出DNA原位雜交技術(shù)。若采用多種方法標(biāo)記DNA探針,故一次雜交可以同時觀察多個探針的信號,使用數(shù)字成像系統(tǒng)(CCD/CMOS),分別多次攝取的信號儲存在計算機(jī)內(nèi),通過軟件系統(tǒng)的處理,終形成一個復(fù)合的多顏色的圖像。



武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。



雜交與顯色

雜交將已標(biāo)記的探針加入預(yù)雜交液即成為雜交液(探針濃度為1μg/m1),切片經(jīng)2×SSC短暫浸洗后,滴加雜交液,于濕盒內(nèi)置37℃或42℃孵育過夜。然后依次經(jīng)2×SSC室溫浸洗1h,l×SSC室溫浸洗lh,0.5×SSC 37℃浸洗30min,0.5×SSC室溫浸洗30min。液相法的核酸單鏈分子都在溶液中,通過分子運動進(jìn)行雜交固相法是將一種核酸單鏈固定在不溶性的介質(zhì)上。注意滴加雜交液時切片勿干燥。


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