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注意步驟
1. 在使用前,將所有試劑放置30分鐘,平衡至室溫。
2. 用試劑預(yù)先潤洗槍頭在使用;取各種樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和試劑必需更換槍頭。
3. 移取標(biāo)準(zhǔn)品和樣品到微孔底部。
4. 從微孔的邊緣加入試劑,以避免污染。
5. 本試劑盒使用可拆分的微孔酶標(biāo)條,使用者可根據(jù)樣品量多少進行拆分。未使用的酶標(biāo)條保持干燥,密封于試劑盒提供的鋁封袋中,于4℃保存。微孔酶標(biāo)條需安裝在相應(yīng)的框架上使用。
6. 在加入顯色底物前,確保微孔內(nèi)沒有殘留的洗滌液。微量殘留的洗滌液可能導(dǎo)致分析結(jié)果的變化。
武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等,與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系,產(chǎn)品銷往全球。
環(huán)磷酸鳥苷(鳥苷-3′,5′-環(huán)化一磷酸,cGMP)在許多生理過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。cGMP由鳥苷酸環(huán)化酶產(chǎn)生,而被磷酸二酯酶降解,因此激l活鳥苷酸環(huán)化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高細胞內(nèi)cGMP的含量。研究發(fā)現(xiàn),cGMP特異性磷酸二酯酶的抑制l劑可用于治l療人類疾病。
因此為篩選出腺苷酸環(huán)化酶的激l活劑或磷酸二酯酶的抑制l劑,需要一個高敏感度、特異性的、可重復(fù)的方案用于檢測cGMP的含量??紤]到大分子的化合物可能存在較弱的影響,這一個初篩是有必要的。
目前商業(yè)化提供的一些cGMP檢測試劑盒主要使用的是非親和純化的cGMP多克l隆抗l體。盡管據(jù)稱有特異性,但這些多克l隆抗cGMP抗l體與cAMP和GTP呈現(xiàn)一定程度的交叉反應(yīng)。且在大多數(shù)細胞類型中,cGMP含量低于cAMP 100倍。
武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等。
做好對照
正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血l清、兔血l清或BSA等封閉。