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水中糞大腸菌群的常見(jiàn)檢測(cè)方法
1、紙片法
采用紙片、紙膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體,將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面,通過(guò)糞大腸菌群在上面的生長(zhǎng)、顯色來(lái)測(cè)定的方法,即糞大腸菌在紙片培養(yǎng)基上呈紅色菌落,菌落周圍產(chǎn)生黃圈是糞大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結(jié)果。
2、酶底物法
將加入酶底物檢測(cè)試劑的100ml水樣注入51孔或97孔的定量測(cè)量盤(pán)中進(jìn)行密封后培養(yǎng),由于大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生一種β-半乳糖苷酶分解PG使得培養(yǎng)液呈黃色,同時(shí)大腸埃希氏菌可以產(chǎn)生葡萄糖醛酸酶分解MUG,培養(yǎng)液將會(huì)在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光反應(yīng)。通過(guò)計(jì)算有黃色反應(yīng)和熒光反應(yīng)的孔穴數(shù),可對(duì)照MPN表查出其代表的糞大腸菌群可能數(shù)水中糞大腸菌群。
水中糞大腸菌群含量的高低就可以直接反映水體糞便污染程度,進(jìn)而指示腸道致病菌污染危害人體健康的風(fēng)險(xiǎn)。腸道致病菌主要包括沙門(mén)氏菌、志賀氏菌和致病性大腸埃希氏菌等,能夠引起各種急慢性腸道gan染、食物中du、腹瀉發(fā)燒等,還可引起泌niao道、呼吸道、傷口和中shu系統(tǒng)疾病。由于在自然界中易,糞大腸菌群的存在可以反映比較近期的糞便污染。
糞大腸菌群傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方法為濾膜法和多管發(fā)酵法。二者均需要有專業(yè)基礎(chǔ)、操作熟練的實(shí)驗(yàn)人員在潔凈無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作,且操作較繁瑣。其中濾膜法檢測(cè)時(shí)間為2-3天,多管發(fā)酵法檢測(cè)時(shí)間為3-5天,檢測(cè)周期長(zhǎng)。
多管發(fā)酵法易染菌,數(shù)據(jù)重現(xiàn)性差;濾膜法在檢測(cè)渾濁度高、非大腸類細(xì)菌密度大的水樣時(shí),準(zhǔn)確性較差。
酶底物(英語(yǔ):substrate)在生物化學(xué)領(lǐng)域指參與生化反應(yīng)的物質(zhì),可為化學(xué)元素、分子或化合物,經(jīng)酶作用可形成產(chǎn)物,一個(gè)生化反應(yīng)的底物往往同時(shí)也是另一個(gè)化學(xué)反應(yīng)的產(chǎn)物。
1、酶是一種有催化功能的蛋白質(zhì)。
2、底物就是能和特異的酶結(jié)合的物質(zhì)。
3、當(dāng)酶結(jié)合其特異底物時(shí),在適當(dāng)條件下,就會(huì)被催化轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)。
檢測(cè)用途:
酶底物法測(cè)定用途:用于檢測(cè)水中總大腸菌群糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)和大腸埃希氏菌??捎糜跈z測(cè)水的類型:飲用水、水源水、廢水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶裝水、中水、二次供水、管網(wǎng)水、畜牧用水、yi療用水等。
食品大腸桿菌菌群檢測(cè)--平板計(jì)數(shù)法
相比于MPN計(jì)數(shù)法,平板計(jì)數(shù)法更適用于大腸菌群含量較高的食品。但大腸菌群多少算是含量較高呢?國(guó)標(biāo)里沒(méi)有明確規(guī)定,但通常認(rèn)為,產(chǎn)品大腸菌群以100CFU/g(mL)為界,超過(guò)這個(gè)含量一般認(rèn)為是含量較高。但具體什么時(shí)候選用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行大腸桿菌菌群的檢測(cè),大部分情況還是要看你的產(chǎn)品執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)。假如產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求大腸菌群含量的單位為CFU/g(mL),那必須選用平板計(jì)數(shù)法。若是/g(mL)或者M(jìn)PN/100g(mL),就應(yīng)選擇MPN計(jì)數(shù)法,MPN法具體選用哪版國(guó)標(biāo)此處不再贅述。因此,根據(jù)自己產(chǎn)品的情況選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法。