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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇
大鼠
大鼠的門齒很長(zhǎng),在抓取方法不當(dāng)而受到驚嚇或激怒時(shí)易將操作者手指咬傷,所以,不要突然式地去抓它,取用時(shí)應(yīng)輕輕抓住其尾巴后提起,置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,用玻璃鐘罩扣住或置于大鼠固定盒內(nèi),這樣即可進(jìn)行尾靜脈取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作時(shí),實(shí)驗(yàn)者應(yīng)戴上棉紗手套(有經(jīng)驗(yàn)者也可不戴),右手輕輕抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其,以防尾巴皮膚脫落,左手抓緊鼠兩耳和頭頸部的皮膚,并將大鼠固定在左手中,右手即可進(jìn)行操作。
雄ji素多囊卵chao綜合征動(dòng)物模型
方法①丙酸gao丸酮造模法:選出生后9d齡雌性大鼠,按1.25mg/只的劑量經(jīng)頸背部一次性皮注射丙酸gao丸酮,21d齡斷乳后動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng),自由飲水和進(jìn)食。模型動(dòng)物70d齡起連續(xù)作涂片11d,觀察到上皮持續(xù)角化者即為造模成功。模型動(dòng)物xue清中4-xiong烯二酮、總gao酮、游離gao酮、胰島素(Ins)和C-肽均顯著升高。②脫氫表雄酮造模法:選23d齡幼年雌性大鼠,按6mg/100g體重的劑量每天經(jīng)皮注射脫氫表雄酮,連續(xù)20d。注射脫氫表雄酮后,模型動(dòng)物的luan巢重量顯著增加并呈多囊樣改變,對(duì)閉鎖luan泡進(jìn)行顯微測(cè)量其平均直徑明顯增大。模型動(dòng)物血qingT、E2和空腹血糖水平明顯升高,空腹及服糖后2h血胰島素水平顯著升高。
2 雌多囊卵chao綜合征動(dòng)物模型
方法 選用未交配雌性成年大鼠,一次性注射戊酸雌二醇2mg/只,16~20d后大鼠上皮出現(xiàn)持續(xù)角化。出現(xiàn)大量閉鎖luan泡,由于正常luan泡數(shù)減少luan巢體積縮小的。xue清LH和FSH水平在10~12d時(shí)降至zui低,以后逐漸上升至56d時(shí)恢復(fù)正常。至56dluan巢呈現(xiàn)多囊樣改變,6個(gè)月后該病理改變呈漸進(jìn)性發(fā)展趨勢(shì)。
膀胱原位癌模型方法
分組及處理雌性C57BL/6小鼠150只,隨機(jī).分成A(膀胱粘膜未預(yù)處理組).B(膀胱粘膜預(yù)處理表淺模型觀察組),C(膀胱粘膜預(yù)處理絲lie霉su治liao組)、D(膀胱粘膜預(yù)處理PBSzhi療對(duì)照組)和E(膀胱粘膜預(yù)處理不zhi療生存期觀察組)5組,每組30只。在灌注MB49膀胱ai細(xì)胞前,其中A組不進(jìn)行預(yù)處理,B、C、D和E組則對(duì)膀胱粘膜進(jìn)行預(yù)處理。在灌注MB49膀胱ai細(xì)胞后,A組不作任何處理;B組在灌注后第7天始每隔3d處死3只解剖觀察膀胱腫liu生長(zhǎng)情況及有無(wú)轉(zhuǎn)移,并取qi官組織(膀胱、shen、輸尿管.心、肝、肺、脾)做病理切片(HE和免yi組化染色);C組在灌注后di1天開始給予si裂mei素(0.05 mg/ml)0.1 m'膀胱灌注zhi療,每隔3d1次,連續(xù)6次;D組灌注后di1天開始給予PBS膀胱灌注,每隔3dl次,連續(xù)6次;E組不作處理。所有小鼠觀察- - 般情況(精神狀態(tài)、飲食、體質(zhì)量等)zhong瘤生長(zhǎng)情況(是否成瘤.腫liu大小.有無(wú)血尿、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等)和生存期,并對(duì)si亡小鼠進(jìn)行解剖,留取膀胱.shen、輸尿管、心、肝、肺、脾等組織用4%福er馬林固定(C.D組小鼠膀胱固定前稱重)。灌注后第60天,處死A.C.D和E組未si亡小鼠,解剖并留取膀胱.shen、輸尿管、心、肝、肺、脾等組織用4%福er馬林固定,C、D.E組小鼠膀胱固定前稱質(zhì)量,
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