制備液相知多少

色譜分析的目的

分析色譜的目的，是分析出混合物中一個(gè)（或者幾個(gè)）純物質(zhì)的含量；制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率，制備色譜的的進(jìn)樣品量很大，導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長(zhǎng)度，使用的相對(duì)多的流動(dòng)相。然而，當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時(shí)候，往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來(lái)說(shuō)。制備色譜要爭(zhēng)取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產(chǎn)品。

　制備液相色譜的特點(diǎn)

      1、制備液相色譜采用了自動(dòng)進(jìn)樣器與全封閉樣品瓶,極大地解放了人力;

　　2、使用高精度HPLC制備色譜泵,重現(xiàn)性良好;

　　3、使用了儀器標(biāo)配ELSD檢測(cè)器,可用于無(wú)紫外吸收樣品檢測(cè);

　　4、使用高壓梯度混合,不需要脫氣機(jī),梯度基本無(wú)滯后;

　　5、可使用5u或10u的制備色譜柱,分離效能可與分析柱等同;

　　6、制備色譜采用燈-鎢燈組合光源,光譜范圍覆蓋190nm-900nm;

　　7、帶有單色儀自校正功能,波長(zhǎng)準(zhǔn)確性可達(dá)0.2 nm;

　　8、帶有光源自檢功能,管理光源壽命,提醒及時(shí)更換;

　　9、可使用各種光程的外置式流通池,更換極為方便;

　　10、儀器支持FLASH色譜組件與中壓色譜組件,使用成本更低;

　　11、檢測(cè)器同時(shí)檢測(cè)4個(gè)波長(zhǎng)的色譜峰,并可以同圖顯示 并指導(dǎo)收集;

　　12、采用1200線高分辨光柵,在紫外-可見(jiàn)范圍具有良好的分光效能。

半制備液相色譜層析系統(tǒng)如何進(jìn)樣品

1、將進(jìn)樣器扭到load朝上，吸取一定量待分離液，快速注入，做過(guò)的是吸取0.2毫升;

2、點(diǎn)擊控制界面菜單欄中“運(yùn)行控制”按鈕樣品信息設(shè)置信息存儲(chǔ)路徑(每次都要做);

3、扭動(dòng)進(jìn)樣器，使處于inload狀態(tài)，保留時(shí)間開(kāi)始計(jì)時(shí);

4、接峰;

5、所有峰出來(lái)后，點(diǎn)擊菜單欄中的中斷中斷，準(zhǔn)備重復(fù)進(jìn)樣。

液相色譜技術(shù)在硝基苯降解過(guò)程中的應(yīng)用

研究了納米零價(jià)鐵還原降解硝基苯的中間產(chǎn)物和產(chǎn)物, 采用液相色譜技術(shù)分析硝基苯降解的部分中間產(chǎn)物。為分析納米零價(jià)鐵還原降解硝基苯的機(jī)理提供信息, 從而為進(jìn)一步提高零價(jià)鐵降解效果提供科學(xué)參考。

除了通過(guò)對(duì)色譜峰的質(zhì)譜圖進(jìn)行譜庫(kù)檢索定性外，還通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行保留至對(duì)照，這樣可以提高定性的可靠性。

(1)苯胺

譜庫(kù)檢索中我們查到降解產(chǎn)物中保留時(shí)間為4.004 min的色譜峰為苯胺(多次重復(fù)后沒(méi)變化)。同時(shí)我們配制苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣, 苯酚的色譜峰的保留時(shí)間也為4.009 min, 進(jìn)一步證實(shí)降解產(chǎn)物的色譜圖中保留時(shí)間為4.004 min 的色譜峰確實(shí)為苯胺的色譜峰。

(2)硝基苯

通過(guò)譜庫(kù)檢索, 未降解完全的硝基苯的色譜峰在色譜圖中保留時(shí)間為6.174 min處。配制硝基苯標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣, 硝基苯的色譜峰的保留時(shí)間也在6.200 min, 進(jìn)一步證實(shí)降解產(chǎn)物的色譜圖中保留時(shí)間為6.174 min的色譜峰確實(shí)為未講解完的硝基苯的色譜峰。

(3)亞硝基苯

通過(guò)譜庫(kù)檢索, 降解產(chǎn)物的色譜圖中保留時(shí)間為6.750 min的色譜峰為亞硝基苯。配制亞硝基苯標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣, 亞硝基苯的色譜峰的保留時(shí)間也為6.900 min, 證實(shí)降解產(chǎn)物的色譜圖中保留時(shí)間為6.900 min的色譜峰確實(shí)為亞硝基苯的色譜峰。

(4)雜峰

分析這兩個(gè)峰，我們并與溶劑峰進(jìn)行了對(duì)比，發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)峰是我們所用的溶劑所產(chǎn)生的。

(5)我們通過(guò)質(zhì)量守恒計(jì)算了硝基苯降解前后的質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)：硝基苯在降解過(guò)程中有中間體的產(chǎn)生，我們稱之為苯基羥胺，之所以我們色譜圖沒(méi)有發(fā)現(xiàn)這個(gè)中間體的色譜峰，主要是因?yàn)樗拇嬖跁r(shí)間很短，在我所用的實(shí)驗(yàn)條件下還不能夠準(zhǔn)備快速測(cè)定出來(lái)，希望后續(xù)研究可以進(jìn)行測(cè)定。