組織研磨機(jī)的詳細(xì)介紹

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      組織研磨機(jī)具有對(duì)稱的一對(duì)高速大振幅的搖臂，研磨罐在水平方向上進(jìn)行高頻鐘擺式振動(dòng)，研磨球在慣性的帶動(dòng)下以高能量反復(fù)撞擊及摩擦，從而達(dá)到粉碎研磨的效果。

研磨罐的運(yùn)動(dòng)是與罐內(nèi)研磨球的運(yùn)動(dòng)進(jìn)行疊加，將樣品充分混合?；旌闲Ч梢酝ㄟ^使用多個(gè)不同直徑的小研磨球來得到進(jìn)一步的提高，高通量組織研磨機(jī)研磨時(shí)使用多個(gè)不同直徑的小研磨球可以大大提高樣品的均混度。對(duì)種子質(zhì)量進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)需要取樣再研磨，像黃豆、豌豆這樣顆粒比較大的種子，尤其需要研碎，而對(duì)于取樣，很明顯，不可能對(duì)所有種子都研究檢驗(yàn)。生物細(xì)胞就可以通過使用大量小球(如瑪瑙球)進(jìn)行細(xì)胞破壁。球與球之間的巨大撞擊和摩擦可有效地實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的破壁。

組織研磨儀研磨魚肉組織實(shí)驗(yàn)具體操作

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 ①取兩塊背部魚肉，每塊五克左右；

②用剪刀將其剪碎，分別裝入兩個(gè)研磨罐，同時(shí)每罐再放入2顆直徑15mm研磨珠，然后旋緊研磨罐，將罐固定在中通量組織研磨儀中；

③將研磨頻率設(shè)定在1800次/分鐘，研磨時(shí)間設(shè)為3-5分鐘，然后啟動(dòng)儀器；
      ④時(shí)間到，儀器自動(dòng)停止，取出樣品即可。

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       多樣品組織研磨儀與組織研磨儀兩者均為實(shí)驗(yàn)室的常用的儀器工具，其主要適用于：研磨、細(xì)胞破碎、勻漿、材料分散、樣品混勻、材料分散、組織均質(zhì)、振蕩等。

應(yīng)用范圍（區(qū)別-優(yōu)勢）：可研磨樣品：

植物組織（根、莖、葉、花、果、種子等）

 動(dòng)物組織（大腦、心臟、肺、胃、胸腺、腸、淋巴、肌肉、骨骼等）        

真菌細(xì)菌（酵母等）

食品藥品 （各類食品、藥片等）

易揮發(fā)樣品（煤炭、油頁巖、蠟制品等）

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每50～100mg 組織加入0.2體積 TRIzol

1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù)：12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿

2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方，蓋緊管蓋，手動(dòng)劇烈震搖15 秒鐘，然后室溫靜置2～3 分鐘。

3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

4. 小心吸取上層水相（無色）加入到新試管中，同時(shí)計(jì)算所吸取的水相體積。不必過多吸取，防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)（中間層，白色）。

5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳，蓋緊管蓋，輕輕搖勻。

6. 室溫靜置10 分鐘，待RNA 充分沉淀（為減少RNA 降解，此步驟可省略）。

7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

8. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），每管加入0.2體積75%乙醇潤洗，蓋緊管蓋，輕輕晃動(dòng)試管，以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。

9. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），打開管蓋，將RNA 沉淀干燥（室溫?fù)]發(fā)或真空干燥）。注意RNA 沉淀不可完全干燥，否則難以溶解。

10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全，將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，或者-70℃保存。