液相色譜操作要求     

1、液相開機前先檢查洗針液、柱塞清洗液是否足夠；     2、液相開機后，首先確保柱塞清洗運行，再執(zhí)行其它操作。     3、開機排氣時，有“purge”閥的儀器應先打開“purge”閥再開泵以5ml/min的流速排氣，關“purge”閥的時候先把流速降到 1ml/min再關，切不可吧順序弄反，否則系統(tǒng)壓力會瞬間變高。     4、使用自動進樣器時，建議啟用“洗針進樣”方式，以降低樣品殘留，對于有些強殘留的物質(zhì)可以選擇降低濃度或減小進樣量。     5、液相色譜系統(tǒng)壓力高時考慮色譜柱堵了，如果將液相色譜換成兩通壓力依舊高，應該考慮系統(tǒng)管路某部分堵了。管路堵的情況下可以使用熱水清洗。對堵塞的通道可以用熱水清洗。

液相色譜不適當操作 　　

（1）在更換零件時選擇的型號有誤，接口不是很匹配，在擰緊的時候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。 　　

（2）樣品處理液凈化得不干凈，長期會在六通閥和柱之間形阻塞不暢。 　　

（3）在使用用手動六通閥時，有些人可能由于手勁小的原因，轉(zhuǎn)動的不到位，于是造成流路形成死堵，壓力快速升高超過警戒值。 　　

（4）在使用金屬管路作出廢液管時，應當注意廢液瓶中先放一些水，并把廢液管的出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見，但卻的確發(fā)生過。

　　制備液相色譜的作用

由于液相色譜儀的溶質(zhì)分子在流動相、靜態(tài)流動相和固定相中的傳質(zhì)過程而導致的峰展寬。溶質(zhì)分子在流動相和固定相中的擴散、分配、轉(zhuǎn)移的過程并不是瞬間達到平衡,實際傳質(zhì)速度是有限的,這一時間上的滯后使色譜柱總是在非平衡狀態(tài)下工作,從而產(chǎn)生峰展寬.液相色譜儀的靈敏度高,分析速度快,操作方便等優(yōu)點,但是受技術條件的限制,沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應用氣相色譜法進行分析。而液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。

使用外力使含有樣品的流動相通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面.當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同,隨著液相色譜儀中流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。

液相色譜儀

20世紀初在俄國的波蘭植物化學家茨維特（Twseet）首先將植物提取物放入裝有碳酸鈣的玻璃管中，植物提取液由于在碳酸鈣中的流速不同分布不同，因此在玻璃管中呈現(xiàn)出不同的顏色，這樣就可以對各種不同的植物提取液進行有效的成分分離。

1941年，馬丁與辛格用一根裝滿硅膠微粒的色譜柱，完成了乙?；被姆蛛x，開啟了液色譜技術，因此獲得諾貝爾化學獎。1949年，馬丁建立了色譜保留值與熱力學常數(shù)之間的關系，奠定了物化色譜的基礎；1952年，馬丁與辛格又創(chuàng)立了氣液色譜法，分離了脂肪酸與脂肪胺。1966年之前科學家所做的努力，為傳統(tǒng)經(jīng)典液相色譜奠定了基礎。

而液相色譜儀的鼻祖則是由斯坦因與莫爾于1958年設計的氨基酸分析儀，這種儀器能夠分蛋白質(zhì)水解的產(chǎn)物。首臺商用LC則是由沃特斯公司制造。

1971年之后，液相色譜技術得到了飛速的發(fā)展，HPLC的分析體制也逐步完善。到了二十世紀八十年代中期，液相色譜技術已經(jīng)非常非常成熟，激動人心的新發(fā)展日趨減少，人們開始轉(zhuǎn)向相關領域發(fā)展，如超臨界色譜、毛管電泳色譜、制備色譜等。