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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴(yán)格脫水。可以清洗掉殘留的強極性雜質(zhì)，并對硅膠表面進(jìn)行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗?？上慈埩舻姆菢O性雜質(zhì)，多次在()沖洗時多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時，柱中應(yīng)充滿或，柱連接處應(yīng)緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時，如果壓力升高，有一種可能是燒結(jié)過的濾片被堵塞，此時應(yīng)更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時，小心將柱頭接頭擰開，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護(hù)、延長柱壽命的作用。使用保護(hù)柱會失去一些柱效，這是值得的。

應(yīng)用過程中的液相色譜四個關(guān)鍵因素1、液相色譜儀本身：通常儀器本身是沒有問題的，尤其是新買回來的儀器。就儀器本身而言，重要的是儀器的檢驗，新買回來的儀器一般都是由賣方先對儀器做系統(tǒng)的確認(rèn)工作(包括 IQ、 PQ、 OQ)，確認(rèn)順利通過后，再請國家或省級儀器檢定局的來校驗，檢定合格后再用，檢定合格后再用，除此之外，還可以放心使用，此外，還可為儀器的正常使用提供保障。2、色譜條件：通常的色譜條件包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速和進(jìn)樣量。移動相是指在制備流動相所用水和試劑試液時，水的電阻率一般不超過18.2兆歐，而水的電阻率不超過18.2兆歐，其原因是為了防止水和試劑試液中雜質(zhì)對色譜結(jié)果的干擾，測試液采用色譜級別。

③先用溶劑將檢測池沖洗，具體用哪種具體的試樣而定；若沖了還不行，把檢測池卸下來，看燈能量，若能量還可以(有個幾千)，可能得清洗光路。首先還是請工程師來清洗，因為要清理的零件在探測器下面有一個黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來很麻煩。④拿出5個樣品盤，可以看到里面有一個黑色凸起(看不清是用電筒)，平時進(jìn)樣針就是從那個地方吸的。伸手就能卸下來，里面有一個小白圈(用多了自然就黑了)，換一個新的就好了，一般只有10個才能買儀器。

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柱材的選擇應(yīng)根據(jù)待分析的樣品性質(zhì)和試驗條件確定。若要分析的樣品易分解或有腐蝕性，應(yīng)考慮使用玻璃管或聚四氟乙烯管。玻璃管柱的優(yōu)點是化學(xué)惰性好，制備的柱子柱效高，便于觀察柱子的填充，而玻璃管易碎是其缺點。PTFE管的優(yōu)點是耐腐蝕，缺點是不耐高溫高壓。目前填充柱中通常采用 zui不銹鋼管。其優(yōu)點是不破碎，傳熱性好，柱壽命長，可滿足一般樣品分析要求。其缺點是內(nèi)壁較粗糙，活性較大，很難清洗干凈。

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在使用前應(yīng)對填充柱進(jìn)行清洗處理，并進(jìn)行試漏檢測。清潔方法與管柱材料有關(guān)。對不銹鋼管，一般采用10%熱浸泡，抽去管內(nèi)壁的油污，再用自來水洗凈。若使用1:20的稀鹽酸溶液重復(fù)處理，則可明顯降低對柱內(nèi)壁的吸附。玻璃柱子的清潔可參考上述方法，不同的是一般用洗液浸泡。類似地，為了降低玻璃的內(nèi)壁活性，可用5%二二氯硅i烷的溶液浸漬處理，然后用和分別洗凈。氣柱檢漏方法比較簡單：可將柱子泡在水中，堵死柱的一端，在另一端通氣，若無氣泡冒出，則說明柱子無泄漏現(xiàn)象。