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發(fā)布時間:2021-08-15 21:19  






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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序,作為參考:以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗,然后按相反的順序沖洗,所有的溶劑必須嚴格脫水??梢郧逑吹魵埩舻膹姌O性雜質,并對硅膠表面進行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗,然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動相不含緩沖液,就可以忽略一步用水沖洗??上慈埩舻姆菢O性雜質,多次在()沖洗時多次注射100-200μ l四氫,有助于去除強疏水性的雜質。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質污染。用稀酸緩沖洗陽離子交換柱,用稀堿緩沖液沖洗,把交換性能很強的鹽去掉,再用水、、(除去固定相表面吸附的有機物)、、水,依次沖洗。

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保存色譜柱時,柱中應充滿或,柱連接處應緊固,防止溶劑揮發(fā)干燥。請勿將緩沖液留在柱內待一夜或更久。8、在使用色譜柱時,如果壓力升高,有一種可能是燒結過的濾片被堵塞,此時應更換濾片或取出清洗;還有一種可能是大分子進入柱內,使柱頭受到污染;如果柱效降低或色譜峰變形,可能會出現柱頭塌陷,體積增大。當出現后兩種情況時,小心將柱頭接頭擰開,用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內填料整平。接著將其填充到色譜柱中,用合適的溶劑潤濕固定相(與柱相同),壓平,然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高,但難以恢復到新柱水平。柱失效一般為柱端,在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米),可起到保護、延長柱壽命的作用。使用保護柱會失去一些柱效,這是值得的。



應用過程中的液相色譜四個關鍵因素1、液相色譜儀本身:通常儀器本身是沒有問題的,尤其是新買回來的儀器。就儀器本身而言,重要的是儀器的檢驗,新買回來的儀器一般都是由賣方先對儀器做系統(tǒng)的確認工作(包括 IQ、 PQ、 OQ),確認順利通過后,再請國家或省級儀器檢定局的來校驗,檢定合格后再用,檢定合格后再用,除此之外,還可以放心使用,此外,還可為儀器的正常使用提供保障。2、色譜條件:通常的色譜條件包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速和進樣量。移動相是指在制備流動相所用水和試劑試液時,水的電阻率一般不超過18.2兆歐,而水的電阻率不超過18.2兆歐,其原因是為了防止水和試劑試液中雜質對色譜結果的干擾,測試液采用色譜級別。

③先用溶劑將檢測池沖洗,具體用哪種具體的試樣而定;若沖了還不行,把檢測池卸下來,看燈能量,若能量還可以(有個幾千),可能得清洗光路。首先還是請工程師來清洗,因為要清理的零件在探測器下面有一個黑色的碎片,中間有一條縫,而且那一塊的螺絲都是八角的,卸起來很麻煩。④拿出5個樣品盤,可以看到里面有一個黑色凸起(看不清是用電筒),平時進樣針就是從那個地方吸的。伸手就能卸下來,里面有一個小白圈(用多了自然就黑了),換一個新的就好了,一般只有10個才能買儀器。




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柱材的選擇應根據待分析的樣品性質和試驗條件確定。若要分析的樣品易分解或有腐蝕性,應考慮使用玻璃管或聚四氟乙烯管。玻璃管柱的優(yōu)點是化學惰性好,制備的柱子柱效高,便于觀察柱子的填充,而玻璃管易碎是其缺點。PTFE管的優(yōu)點是耐腐蝕,缺點是不耐高溫高壓。目前填充柱中通常采用 zui不銹鋼管。其優(yōu)點是不破碎,傳熱性好,柱壽命長,可滿足一般樣品分析要求。其缺點是內壁較粗糙,活性較大,很難清洗干凈。

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在使用前應對填充柱進行清洗處理,并進行試漏檢測。清潔方法與管柱材料有關。對不銹鋼管,一般采用10%熱浸泡,抽去管內壁的油污,再用自來水洗凈。若使用1:20的稀鹽酸溶液重復處理,則可明顯降低對柱內壁的吸附。玻璃柱子的清潔可參考上述方法,不同的是一般用洗液浸泡。類似地,為了降低玻璃的內壁活性,可用5%二二氯硅i烷的溶液浸漬處理,然后用和分別洗凈。氣柱檢漏方法比較簡單:可將柱子泡在水中,堵死柱的一端,在另一端通氣,若無氣泡冒出,則說明柱子無泄漏現象。



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