MRS液體培養(yǎng)基里于試管中進(jìn)行傳代培養(yǎng)到20代

菌株的分離[14-15]：先取1 mL醋醅樣品加入9 mL滅過菌的生理鹽水中，然后依次做梯度稀釋至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6，然后用滅過菌的移液管各濃度吸取100 μL醋醅移至培養(yǎng)基上，在37 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～36 h后，觀察單菌落，挑取不同形態(tài)、大小的單菌落進(jìn)行劃線純化，3次分離純化之后，對(duì)菌株進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，并確定菌株形態(tài)，將鏡檢菌株接種在MRS液體培養(yǎng)基里于試管中進(jìn)行傳代培養(yǎng)到20代，置于4 ℃冰箱保存，備用。2、抗逆防衰促進(jìn)生長(zhǎng)：提高作物抗逆性，促進(jìn)作物快速生根，提系發(fā)育能力，促進(jìn)植物健康生長(zhǎng)。

分泌抑菌物質(zhì),拮抗病原菌芽孢桿菌發(fā)揮益生作用的主要機(jī)制

分泌抑菌物質(zhì) ，拮抗病原菌

芽孢桿菌發(fā)揮益生作用的主要機(jī)制之一在于產(chǎn)生胞外活性物質(zhì) ，包 括脂肽類、肽類、蛋白類等 。這些代謝產(chǎn)物能夠抑制細(xì)菌、真菌 、病 毒等 。

產(chǎn)生多種酶類，提高消化酶活性

解淀粉芽孢桿菌在代謝過程中能夠分泌蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶等，可以補(bǔ)充機(jī)體內(nèi)源消化酶的不足 ，提高對(duì)養(yǎng)分的消化吸收，從而改善動(dòng)物的生長(zhǎng)。

解淀粉芽孢桿菌F1株拮抗的適宜培養(yǎng)條件

在畜產(chǎn)品加工領(lǐng)域的應(yīng)用

單核細(xì)胞增生李斯特菌作為一種常見的食源性致病菌，其引起的李斯特菌病由于高致死率而被廣泛關(guān)注。Kaewklo等發(fā)現(xiàn)，解淀粉芽孢桿菌SP-1-13LM株產(chǎn)生的一種新細(xì)菌素amysin具有抗李斯特菌的作用，純化的amysin可抑制產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌、沙門菌和志賀菌。100℃條件下amysin的活性可保持60 min，在pH為3～9的條件下均有活性，但是在蛋白酶κ、α-胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶作用下活性會(huì)消失，說明其為天然的蛋白質(zhì)，SDS-PAGE分析純化的分子量為5.2 ku。其抗李斯特菌的活性在4℃保存的片狀香腸中也被觀察到，推測(cè)可作為一種安全的生物防腐劑。水解淀粉和明膠，乙酰甲(V-P)試驗(yàn)陰性，還原試驗(yàn)陰性，苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、試驗(yàn)、紅(MR)試驗(yàn)、試驗(yàn)均為陰性[1,2,3]。

饒勝其等研究表明，解淀粉芽孢桿菌F1株拮抗的適宜培養(yǎng)條件為初始pH 5.5、32cC培養(yǎng)48 h；添加0.4％蔗糖、0.2％檸檬酸銨、0.02％KNO3的營(yíng)養(yǎng)肉湯發(fā)酵上清液對(duì)的抑菌率為75.2％；解淀粉芽孢桿菌具有廣譜抗病作用的生，具有菌含量高、活性高、穩(wěn)定性強(qiáng)等特點(diǎn)，施用后抗病增產(chǎn)效果顯著，解淀粉芽孢桿菌還具有抗逆防衰，促進(jìn)生長(zhǎng)。研究還發(fā)現(xiàn)，該上清超濾液(30～100 ku)能抑制的孢子萌發(fā)、延緩菌絲發(fā)育，質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL的蛋白能完全抑制的產(chǎn)生。

此外，解淀粉芽孢桿菌產(chǎn)生的凝乳酶還可以用于奶酪的加工中，且有助于蛋白水解率的提高，縮短成熟期。

解淀粉芽孢桿菌生物制劑

解淀粉芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens (Fukumoto) Priest是一種嗜溫、好氧、產(chǎn)芽孢的桿狀細(xì)菌，革蘭氏陽性，其生理特征多樣，在自然界中廣泛存在，對(duì)人畜無毒無害，不污染環(huán)境。在其生長(zhǎng)過程中可以產(chǎn)生多種次生代謝產(chǎn)物和酶類，具有抑制病原真菌、細(xì)菌和病毒活性的能力。1、解淀粉芽孢桿菌的生理生化特性 解淀粉芽孢桿菌可產(chǎn)生多種α-淀粉酶及蛋白酶，與枯草芽孢桿菌在形態(tài)、培養(yǎng)特征及生理生化特性方面非常相似。

解淀粉芽孢桿菌生物制劑是以解淀粉芽孢桿菌為有效菌，經(jīng)發(fā)酵和超濾濃縮膜分離加工技術(shù)制成的微生物菌劑。具有適應(yīng)性強(qiáng)、活性高、內(nèi)生傳導(dǎo)的特點(diǎn)，通過營(yíng)養(yǎng)和空間位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)、拮抗作用、溶菌作用，能抑制多種病原微生物生長(zhǎng)，并具有促進(jìn)作物生長(zhǎng)、改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、提高、改善農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境等作用。ruckeri)或產(chǎn)氣莢膜梭菌攻毒后飼喂解淀粉芽孢桿菌的魚存活率更高，說明Ba可增強(qiáng)尼羅羅非魚的和抗病能力。