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細(xì)胞在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)注意事項!
1) 如果細(xì)胞未在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng),只需搖晃、刮取或胰蛋白酶處埋(見下文“胰蛋白酶處理分離細(xì)胞”)即可將細(xì)胞從細(xì)胞瓶表面分離下來。
2) 輕輕地吹打細(xì)胞(移液管上下吹打),將細(xì)胞團(tuán)吹散。
3) 取1ml 細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),勿讓細(xì)胞沉積在瓶底。輕輕來回轉(zhuǎn)動細(xì)胞瓶使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài)。
4) 稀釋細(xì)胞,使其終濃度約為每毫升 2x105~4x105。
5) 進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),并用臺盼藍(lán)排斥試驗進(jìn)行細(xì)胞活力檢測,操作方案見下文“細(xì)胞計數(shù)”。
TECHNE生物反應(yīng)器懸浮細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的構(gòu)成?
TECHNE生物反應(yīng)器懸浮細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的構(gòu)成?
TECHNE懸浮細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)主要由生物反應(yīng)器及生物反應(yīng)器專用攪拌器構(gòu)成!此外,懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞能充分利用培養(yǎng)空間,而且能夠非常直觀觀察到細(xì)胞規(guī)模擴大。其中生物反應(yīng)器由低析出的硼硅玻璃制作,具有良好的耐高溫、耐溫差和通透性;配套的生物反應(yīng)器攪拌器為一種低速磁力攪拌器,該攪拌器的特點是速度控制準(zhǔn)確,軟件顯示速度與實際速度小于等于3轉(zhuǎn),同時,具有緩慢加速與緩慢減速功能,有利于細(xì)胞的生長。
TECHNE生物反應(yīng)專用磁力攪拌器與常規(guī)的攪拌器的區(qū)別?
TECHNE生物反應(yīng)專用磁力攪拌器與常規(guī)的攪拌器的區(qū)別?
一種低成本的懸浮培養(yǎng)技術(shù)的X大優(yōu)勢在于(帶耳的旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶加細(xì)胞培養(yǎng)用低速磁力攪拌器):
生物反應(yīng)專用磁力攪拌器需要配合生物反應(yīng)專用的旋轉(zhuǎn)瓶及葉片使用,它與常規(guī)的磁力攪拌器主要體現(xiàn)在以下幾方面的不同:
1 TECHNE生物專用攪拌器轉(zhuǎn)速底,X高轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)左右;
2 TECHNE生物專用磁力攪拌器轉(zhuǎn)速控制精X確,示值誤差小于3轉(zhuǎn);
3 TECHNE生物專用磁力攪拌器具有緩加速和緩減速功能,能夠在加速和減速過程中保護(hù)被培養(yǎng)的細(xì)胞而不破壞細(xì)胞;
貼壁依賴細(xì)胞如何實現(xiàn)懸浮的動態(tài)培養(yǎng)?
貼壁依賴細(xì)胞如何實現(xiàn)懸浮的動態(tài)培養(yǎng)?
轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)系統(tǒng)提供了一種方便、經(jīng)濟的針對貼壁依賴細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)方法{轉(zhuǎn)瓶}!2通常常規(guī)的磁力攪拌器由于僅僅是起到攪拌作用的,因此轉(zhuǎn)速控制精度較低。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)一般用于小量培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)的過渡階段,或作為生物反應(yīng)器接種細(xì)胞準(zhǔn)備的一條途徑。 細(xì)胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中,培養(yǎng)過程中轉(zhuǎn)瓶內(nèi)的旋轉(zhuǎn)葉片不斷旋轉(zhuǎn)攪動培養(yǎng)液,使細(xì)胞隨著培養(yǎng)液的轉(zhuǎn)動而懸浮交替接觸培養(yǎng)液和空氣,從而提供較好的傳質(zhì)和傳熱條件。
轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)具有結(jié)構(gòu)簡單,投資少,技術(shù)成熟,重復(fù)性好,放大只需簡單的增加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點。