廣州碩譜生物科技有限公司氧化鋁SPE柱類型

為什么反相填料C18使用時(shí)建議溶液的PH范圍是2-8？

C18填料是十八烷1基硅1烷鍵合硅膠，pH值超出酸性范圍時(shí)，鍵合相十八烷1基易發(fā)生水解而流失；當(dāng)流動(dòng)相pH超出堿性范圍時(shí)，會(huì)加速硅膠的溶解。這兩種反應(yīng)均是不可逆的反應(yīng)，會(huì)影響填料的性能。

當(dāng)我們極端pH條件下需要使用反相填料時(shí)，建議使用聚合物基質(zhì)的反相填料，如HLB,PSD等，聚合物基質(zhì)的填料pH耐受范圍是1-14，適用范圍非常廣哦。

SPE小柱的使用過(guò)程

下面我們?cè)O(shè)定填料為保留目標(biāo)化合物，分析過(guò)程如下：

1、預(yù)洗活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)，飽和平衡柱。依次用強(qiáng)溶劑、弱溶劑（緩沖溶液）進(jìn)行活化。

2、上樣——將樣品（包括分離物和干擾物）用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分通過(guò)吸附劑，吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。

3、淋洗——用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟次絼瓜惹氨Ａ舻母蓴_物選擇性的淋洗掉，分離物富集保留在吸附劑上。

4、洗脫——用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)從吸附劑上洗脫下來(lái)并收集。

固相萃取

固相萃取是一種基于色譜分離的樣品前處理方法，是近年來(lái)應(yīng)用zui為廣泛和成熟的樣品前處理方法。固相萃取包括(含有某些官能團(tuán)的固體吸附劑)和液相(樣品和溶劑)。因?yàn)楣滔噍腿∥絼┚哂胁煌墓δ芑鶊F(tuán)，所以可以吸附和保留特定化合物于固相萃取柱。

固相萃取按其用途可分為兩種模式。其中， spe柱是典型的固相萃取方式，其主要作用是吸附被稱為目標(biāo)物吸附的化合物；雜質(zhì)吸附式固相萃取是指 spe柱吸附樣品中的雜質(zhì)，目標(biāo)物質(zhì)流穿不保留。

預(yù)柱或保護(hù)柱用還是不用的問題！原來(lái)分析中藥品種時(shí)，我一直都是用保護(hù)柱。但來(lái)到新公司后，發(fā)現(xiàn)大家都沒有使用，幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室連保護(hù)柱都沒找到一個(gè)，也就是說(shuō)大家從來(lái)都沒有用過(guò)。后來(lái)問一個(gè)老員工，說(shuō)是有可能影響藥品分析。我就想問：安裝保護(hù)柱后會(huì)影響樣品分析嗎？我們做的大多是頭1孢類的抗1生素。

答：應(yīng)該這樣說(shuō)，加上保護(hù)柱，肯定有利于保護(hù)色譜柱不受一些顆粒物質(zhì)的堵塞，肯定有害于分離度和柱效，因?yàn)楸Ｗo(hù)柱中間有著死體積的存在但是如果保護(hù)柱接得好，并且盡量控制其匹配性和經(jīng)常更換，分離度和柱效應(yīng)該影響并不大。

原來(lái)的是柱色譜,也叫柱層析,初始分離葉綠素時(shí)，是將碳酸鈣等粉體填入柱子中制成。隨后，薄層色譜被簡(jiǎn)化。

化學(xué)鍵合色譜，就固定相而言，碳酸鈣、硅藻土等作固定相雖然經(jīng)典，但應(yīng)用范圍不夠廣。之后，有機(jī)分子利用化學(xué)反應(yīng)通過(guò)共價(jià)鍵與載體(硅膠)表面結(jié)合，形成均勻牢固的單分子薄層，從而形成固定相。分離器的分離機(jī)制兼具吸附和分配兩種。可分離物質(zhì)的范圍擴(kuò)大了。

固體萃取柱的選用

萃取柱的選擇通常是從兩個(gè)方面來(lái)考慮的：吸附劑和柱規(guī)格的選擇。合適的吸附填料可使干擾物質(zhì)與目標(biāo)成分很好地分離，滿足回收要求。而且吸附劑能夠吸附的化合物的質(zhì)量是有限的，當(dāng)樣品量太大時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)“過(guò)載”，使目標(biāo)物直接“穿透萃取柱而不留。

吸附劑的選擇主要根據(jù)目標(biāo)化合物的性質(zhì)和基質(zhì)的性質(zhì)。

吸附劑的選擇大致可以通過(guò)上述兩種方式來(lái)選擇，具體例子中，可以根據(jù)“分清目標(biāo)化合物與主要干擾物”的原則來(lái)

在選擇了合適的吸附劑后，還要根據(jù)檢定所需的試樣數(shù)量，選擇合適的柱規(guī)格。因?yàn)檩腿≈械奈絼┠芪降幕衔锏馁|(zhì)量有限，一旦超出這一數(shù)值，目標(biāo)物就無(wú)法有效保留，從而大大降低洗脫效果。因此，根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格，是很有必要的。

固相萃?。⊿PE）技術(shù)是目前十分常見的樣品前處理方法，廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境、生物樣品等諸多領(lǐng)域的檢測(cè)。在規(guī)格種類繁多的固相萃取柱（SPE小柱）中，聚乙烯吡咯烷酮基質(zhì)SPE(如常見的HLB小柱)占有重要一席。

這類基質(zhì)具有良好的水可浸潤(rùn)性和化學(xué)穩(wěn)定性，表面同時(shí)具有親水性和疏水性官能團(tuán)，從而對(duì)各類極性、非極性化合物具有均衡的吸附作用。其吸附能力大，樣品容量高，對(duì)大部分有機(jī)物的吸附容量增大，回收率也更高，且在吸附后有機(jī)物容易被定量洗脫。

固相萃取柱的預(yù)處理

在萃取樣品之前，吸附劑必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，一足為了潤(rùn)濕和活化固相萃取填料，以使目標(biāo)萃取物與固相表面緊密接觸，易于發(fā)生分子間相互作用；二是為了除去填料中可能存在的雜質(zhì)．減少污染。采取的方法是用一定量溶劑沖洗萃取柱。

反相類型的固相萃取硅膠和非極性吸附劑介質(zhì)，通常用水溶性有機(jī)1溶劑如甲1醇預(yù)處理，甲1醇潤(rùn)濕吸附劑表面和滲透鍵臺(tái)烷1基相，便于水更有效地潤(rùn)濕硅膠表面。然后用水或緩沖溶液替換滯留在柱中的甲1醇，以使樣品水溶液與吸附劑表面有良好的接觸，提高萃取效率。正相類型的固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的有機(jī)1溶劑來(lái)預(yù)處理。離子交換填料一般用3—5ml。去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來(lái)預(yù)處理。