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熒光分光光度計種類
熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點,可以廣泛應用于生命科學、醫(yī)學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。熒光分光光度計的發(fā)展經歷了手控式熒光分光光度計,自動記錄式熒光分光光度計,計算機控制式熒光分光光度計三個階段;熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計,配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計等。
熒光分光光度計是紫外嗎
熒光分光光度計不是紫外,這是兩個不同的概念。
紫外分光光度計檢測物質環(huán)境的要求較低。其應用波長范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見光區(qū)。
熒光分光光度計檢測物質要求環(huán)境高,微量檢測,結果較準確,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。在溶液中,當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即IF=KC,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,對被測物質要求高。相比較,熒光光度計較準確。
淺析熒光光譜
無論分子初處于哪一個激發(fā)單重態(tài),通過內轉換及振動弛豫,均可返回到激發(fā)單重態(tài)的低振動能級,然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)的任一振動能級上,這時發(fā)射的光稱為熒光。由于振動弛豫和內轉換損失了部分能童,故熒光的波長總比激發(fā)光波長要長。發(fā)射熒光的過程為 秒。由于電子返回基態(tài)時可以停留在基態(tài)的任一振動能級上,因此得到的熒光譜線有時呈現(xiàn)幾個非??拷姆?。通過進一步振動弛豫,這些電子都很快地回到基態(tài)的低振動能級。
熒光光譜的壽命
熒光物質具有兩個重要的發(fā)光參數(shù):熒光壽命和熒光產率。熒光壽命(τ)是指當激發(fā)停止后,分子的熒光強度降到激發(fā)時強度的1/e所需的時間,它表示粒子在激發(fā)態(tài)存在的平均時間,通常稱為激發(fā)態(tài)的熒光壽命。與穩(wěn)態(tài)熒光提供一個平均信號不同,熒光壽命提供的是激發(fā)態(tài)分子的信息,前者可以告訴你事情發(fā)生了,而后者可以告訴你為什么發(fā)生。