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全自動核酸提取儀簡介
核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器。它可替代原來復雜的手動操作,儀器自動完成對細胞或組織的處理,分析提取出目標DNA/RNA。
目前市場上的核酸提取儀的提取原理主要分為兩種:磁珠法和膜吸附法,其中磁珠法占市場主流地位。
磁珠法提取核酸是通過細胞裂解液裂解細胞,從細胞中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中。反應一定時間之后,再在磁場作用下,使磁性顆粒與液體分開,回收顆粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到純凈的DNA。
全自動核酸提取儀的作用
隨著分子生物學技術(shù)的高速發(fā)展,以核酸雜交、核酸擴增及核酸序列分析等為代表的分子診斷和檢測技術(shù)的重要作用日益凸顯。樣品前處理所花費的時間占整個分析過程的60%,而檢測誤差的90%出現(xiàn)在前處理領(lǐng)域。核酸提取作為分子診斷實驗關(guān)鍵的一步,其獲得的核酸質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到下游分子生物學試驗的成敗。
全自動核酸提取儀——原理介紹
磁珠法核酸提取儀的基本原理概括總結(jié)
1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的提取,一般通過操作系統(tǒng)控制機械臂來實現(xiàn)轉(zhuǎn)移。提取過程如下:
1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現(xiàn)反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。
2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質(zhì),在外加磁場作用下,將液體移出。
4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結(jié)合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通過固定液體,轉(zhuǎn)移磁珠來實現(xiàn)核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現(xiàn)核酸的提取。