廣州碩譜生物科技有限公司氧化鋁SPE柱類型

為什么反相填料C18使用時建議溶液的PH范圍是2-8？

C18填料是十八烷1基硅1烷鍵合硅膠，pH值超出酸性范圍時，鍵合相十八烷1基易發(fā)生水解而流失；當流動相pH超出堿性范圍時，會加速硅膠的溶解。這兩種反應均是不可逆的反應，會影響填料的性能。

當我們極端pH條件下需要使用反相填料時，建議使用聚合物基質(zhì)的反相填料，如HLB,PSD等，聚合物基質(zhì)的填料pH耐受范圍是1-14，適用范圍非常廣哦。

SPE小柱的使用過程

下面我們設定填料為保留目標化合物，分析過程如下：

1、預洗活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)，飽和平衡柱。依次用強溶劑、弱溶劑（緩沖溶液）進行活化。

2、上樣——將樣品（包括分離物和干擾物）用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分通過吸附劑，吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。

3、淋洗——用適當?shù)娜軇┝芟次絼?，使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉，分離物富集保留在吸附劑上。

4、洗脫——用小體積的溶劑將被測物質(zhì)從吸附劑上洗脫下來并收集。

固相萃取

固相萃取是一種基于色譜分離的樣品前處理方法，是近年來應用zui為廣泛和成熟的樣品前處理方法。固相萃取包括(含有某些官能團的固體吸附劑)和液相(樣品和溶劑)。因為固相萃取吸附劑具有不同的功能基團，所以可以吸附和保留特定化合物于固相萃取柱。

固相萃取按其用途可分為兩種模式。其中， spe柱是典型的固相萃取方式，其主要作用是吸附被稱為目標物吸附的化合物；雜質(zhì)吸附式固相萃取是指 spe柱吸附樣品中的雜質(zhì)，目標物質(zhì)流穿不保留。

預柱或保護柱用還是不用的問題！原來分析中藥品種時，我一直都是用保護柱。但來到新公司后，發(fā)現(xiàn)大家都沒有使用，幾個實驗室連保護柱都沒找到一個，也就是說大家從來都沒有用過。后來問一個老員工，說是有可能影響藥品分析。我就想問：安裝保護柱后會影響樣品分析嗎？我們做的大多是頭1孢類的抗1生素。

答：應該這樣說，加上保護柱，肯定有利于保護色譜柱不受一些顆粒物質(zhì)的堵塞，肯定有害于分離度和柱效，因為保護柱中間有著死體積的存在但是如果保護柱接得好，并且盡量控制其匹配性和經(jīng)常更換，分離度和柱效應該影響并不大。

原來的是柱色譜,也叫柱層析,初始分離葉綠素時，是將碳酸鈣等粉體填入柱子中制成。隨后，薄層色譜被簡化。

化學鍵合色譜，就固定相而言，碳酸鈣、硅藻土等作固定相雖然經(jīng)典，但應用范圍不夠廣。之后，有機分子利用化學反應通過共價鍵與載體(硅膠)表面結(jié)合，形成均勻牢固的單分子薄層，從而形成固定相。分離器的分離機制兼具吸附和分配兩種。可分離物質(zhì)的范圍擴大了。

固體萃取柱的選用

萃取柱的選擇通常是從兩個方面來考慮的：吸附劑和柱規(guī)格的選擇。合適的吸附填料可使干擾物質(zhì)與目標成分很好地分離，滿足回收要求。而且吸附劑能夠吸附的化合物的質(zhì)量是有限的，當樣品量太大時，就會出現(xiàn)“過載”，使目標物直接“穿透萃取柱而不留。

吸附劑的選擇主要根據(jù)目標化合物的性質(zhì)和基質(zhì)的性質(zhì)。

吸附劑的選擇大致可以通過上述兩種方式來選擇，具體例子中，可以根據(jù)“分清目標化合物與主要干擾物”的原則來

在選擇了合適的吸附劑后，還要根據(jù)檢定所需的試樣數(shù)量，選擇合適的柱規(guī)格。因為萃取柱中的吸附劑能吸附的化合物的質(zhì)量有限，一旦超出這一數(shù)值，目標物就無法有效保留，從而大大降低洗脫效果。因此，根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格，是很有必要的。

固相萃取（SPE）技術(shù)是目前十分常見的樣品前處理方法，廣泛應用于食品、環(huán)境、生物樣品等諸多領(lǐng)域的檢測。在規(guī)格種類繁多的固相萃取柱（SPE小柱）中，聚乙烯吡咯烷酮基質(zhì)SPE(如常見的HLB小柱)占有重要一席。

這類基質(zhì)具有良好的水可浸潤性和化學穩(wěn)定性，表面同時具有親水性和疏水性官能團，從而對各類極性、非極性化合物具有均衡的吸附作用。其吸附能力大，樣品容量高，對大部分有機物的吸附容量增大，回收率也更高，且在吸附后有機物容易被定量洗脫。

固相萃取柱的預處理

在萃取樣品之前，吸附劑必須經(jīng)過適當?shù)念A處理，一足為了潤濕和活化固相萃取填料，以使目標萃取物與固相表面緊密接觸，易于發(fā)生分子間相互作用；二是為了除去填料中可能存在的雜質(zhì)．減少污染。采取的方法是用一定量溶劑沖洗萃取柱。

反相類型的固相萃取硅膠和非極性吸附劑介質(zhì)，通常用水溶性有機1溶劑如甲1醇預處理，甲1醇潤濕吸附劑表面和滲透鍵臺烷1基相，便于水更有效地潤濕硅膠表面。然后用水或緩沖溶液替換滯留在柱中的甲1醇，以使樣品水溶液與吸附劑表面有良好的接觸，提高萃取效率。正相類型的固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的有機1溶劑來預處理。離子交換填料一般用3—5ml。去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來預處理。