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液相色譜儀應用范圍
它的應用范圍比較大,而且有不斷拓展的趨勢。制備純化樣品是它的基礎功能,通過色譜分離,樣品中目標物質(zhì)被分離出來有待進一步研究,比如分離水樣中有機物、食品中以備分析等。然后是天然成分研究,有助于中藥學的發(fā)展。分析前人留下的珍貴藥典,通過藥性研究造福人類。提高產(chǎn)品質(zhì)量,以提高它的價值和效用,比如純化藥品、純化蛋白質(zhì)制品等。還有一個方向是用于產(chǎn)品合成的研究,通過獲得一些純度較高的化合物將以促進合成實驗的進行。
液相色譜的注意事項
特別提示
1).流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。2).柱子是非常脆弱的,首先做的方法,先不要讓液體過柱子。
3).所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
4).壓力不能太大,盡量不要超過150kgf/cm2.
5).因為緩沖試劑遇有機的溶劑,會結晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。
色譜法分類
按兩相的物理狀態(tài)可分為:氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用于分離揮發(fā)性化合物。GC根據(jù)固定相不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC),其中以GLC應用很廣。液相色譜法適用于分離低揮發(fā)性或非揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)。LC同樣可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC),它以超臨界流體(界于氣體和液體之間的一種物相)為流動相(常用CO2),因其擴散系數(shù)大,能很快達到平衡,故分析時間短,特別適用于手性化合物的拆分。
按原理分為吸附色譜法(AC)、分配色譜法(DC)、離子交換色譜法(IEC)、排阻色譜法(EC,又稱分子篩、凝膠過濾(GFC)、凝膠滲透色譜法(GPC)和親和色譜法。(此外還有電泳。)
按操作形式可分為紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。