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烏蘭察布亞細(xì)胞定位電話“本信息長期有效”

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發(fā)布時(shí)間:2020-07-19 05:36  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;植物修復(fù)(phytoremediation)是近來發(fā)展起來的一種利用合適的超富集植物徹底清除重金屬污染的綠色技術(shù)。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




甘蔗是的糖料作物,甘蔗黑穗病已成為世界性甘蔗主要病害,也是我國甘蔗栽培上嚴(yán)重的真菌病害,挖掘甘蔗自身抗病基因?qū)共∮N有重要意義。植物病程相關(guān)蛋白(Pathogenesis Related Proteins,PRP/PRs)是在某種病理或病理相關(guān)環(huán)境條件下,植物體內(nèi)受誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異蛋白質(zhì),其在植物抗病反應(yīng)中起重要作用,與植物系統(tǒng)獲得性抗性(systemic acquiredresistance,SAR)密切相關(guān)。β-1,3-葡聚糖酶屬于典型的PR2蛋白,可水解許多種真菌細(xì)胞壁的主要成分β-1,3-葡聚糖,在植物抵御真菌病原的防衛(wèi)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。本研究在甘蔗響應(yīng)黑穗病菌侵染的表達(dá)譜分析的基礎(chǔ)上,選擇與防衛(wèi)蛋白相關(guān)的差異表達(dá)基因序列,利用電子,結(jié)合RT-PCR和基因?qū)嶒?yàn)技術(shù),以高抗黑穗病的甘蔗無性系Ya05-179為實(shí)驗(yàn)材料,擴(kuò)增獲得甘蔗β-1,3-葡聚糖酶家族基因的2個(gè)成員,并命名為ScBG1和ScBG2。通過比較不同侵染液濃度、侵染時(shí)間、取材部位、預(yù)處理等條件下的轉(zhuǎn)化效果,優(yōu)化了農(nóng)介導(dǎo)的洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化系統(tǒng),并且成功檢測到大蕉ASR蛋白(MpASR)與GFP的融合蛋白在洋蔥表皮細(xì)胞中的分布。生物信息學(xué)分析顯示,ScBG1基因DNA序列全長1 175bp,編碼332個(gè)氨基酸,含有1個(gè)長度為156bp的內(nèi)含子;ScBG2基因DNA序列全長1 820bp,編碼392個(gè)氨基酸,含2個(gè)長度分別為156bp和973bp的內(nèi)含子;上述2個(gè)基因核酸序列的同源性為39.58%,均屬于糖基水解酶第十七家族。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);WRKY轉(zhuǎn)錄因子和病程相關(guān)蛋白(pathogenesis-relatedproteins,PRs)在植物抗病信號(hào)調(diào)控途徑中起著重要作用。可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




實(shí)驗(yàn)室前期研究表明,將來自水稻黃單胞菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)的Harpin蛋白編碼基因hrf1轉(zhuǎn)化水稻,獲得的轉(zhuǎn)基因株系NJH12能夠提高對(duì)水稻稻瘟病、水稻白葉枯病和干旱的抗性。對(duì)NJH12表達(dá)芯片進(jìn)行分析,篩選出大量與受體植株有顯著差異表達(dá)的基因。 OsSsrl (Oryza sativa L. salt-sensitive related gene1, GeneBank登錄號(hào)為NM_001065574)是NJH12表達(dá)譜中的一個(gè)表達(dá)量上調(diào)基因,為了進(jìn)一步分析其序列特征、啟動(dòng)子序列、亞細(xì)胞定位及在水稻不同組織和各種逆境脅迫下的表達(dá)模式,通過生物信息學(xué)手段、洋蔥表皮亞細(xì)胞定位和Real-Time PCR對(duì)其進(jìn)行研究。序列分析表明OsSsr1的開放閱讀框?yàn)?004bp,編碼一個(gè)由667個(gè)氨基酸組成并含有5個(gè)跨膜區(qū)的蛋白,該蛋白N端含有一個(gè)信號(hào)肽。其啟動(dòng)子序列包含TGACG-motif、ABRE、 TCA-element、Box-W1、W box和Box S等多個(gè)與脅迫相關(guān)的順式作用元件。GFP融合表達(dá)顯示,OsSsrl蛋白定位于細(xì)胞膜。Real-Time PCR結(jié)果表明,OsSsrl基因在水稻不同不同組織中均有表達(dá),在葉部的表達(dá)量,其次為根,在幼穗中的表達(dá)量;本研究根據(jù)柑橘潰瘍病高感品種紐荷爾臍橙(Citrussinensis(L。OsSsrl表達(dá)水平受干旱、高溫、高鹽、低溫、機(jī)械傷害、稻瘟病菌、MeJA和ABA的誘導(dǎo)上調(diào)。


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蔗果寡糖是寡糖中非常重要的一類,廣泛存在于洋蔥、香蔥、牛蒡、菊芋、香蕉、小麥、黑麥、燕麥中,形式多種多樣。其中菊粉中的蔗果寡糖的含量較豐富,占?jí)K莖干重70%—80%。天然存在的蔗果寡糖是由微生物或植物中具有果糖基轉(zhuǎn)移活性的酶作用而產(chǎn)生的。目前生產(chǎn)的蔗果寡糖是將微生物中苷酶或果糖轉(zhuǎn)移酶作用于蔗糖而制備獲得。蔗果寡糖是雙歧因子,能促進(jìn)雙歧增殖,而雙歧是典型的有益菌,它可吸收,合成多種維生素,促進(jìn)腸蠕動(dòng),分泌乳酸,抑制某些有害菌生成,防止,增體等諸多功能。且攝入蔗果寡糖不會(huì)引起血糖值和胰島素升高,對(duì)受胰島素控制的肝糖原的合成也無影響,可以作為和患者的保健甜味劑。而人體內(nèi)雙歧的數(shù)目隨著年齡的增長,環(huán)境污染及的使用等原因,含量逐漸下降。僅從維持腸道中微生物區(qū)系平衡出發(fā),就應(yīng)該人為地補(bǔ)充雙歧。既然蔗果寡糖可以預(yù)防和調(diào)節(jié)多種疾病,并且對(duì)人體沒有任何毒副作用,被認(rèn)為營養(yǎng)型,已被許多國家批準(zhǔn)使用于食品、化妝品、藥品、飼料等。因此,可以通過加強(qiáng)蔗糖果糖基轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)來提高番茄果實(shí)中蔗果寡糖含量,培育出的富含蔗果寡糖的番茄果實(shí)具有很好的食用價(jià)值和發(fā)展前景。0cm2洋蔥表皮的玻璃皿中,邊振蕩邊加入10μLpCambia2301-GaMYB2-GFP質(zhì)粒,逐步加入40μL0。


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洋蔥(Allium cepa L.)屬百合科蔥屬,是世界主栽蔬菜之一,也是我國主要的出口蔬菜之一。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是開花植物光周期反應(yīng)過程中調(diào)控植物成花的關(guān)鍵基因,也是重要的開花整合因子。實(shí)驗(yàn)室在前期工作中已經(jīng)成功了洋蔥的開花素類似基因Ac FT1及Ac LFT,為確定其功能,本試驗(yàn)分別構(gòu)建了Ac FT1及Ac LFT的正義、反義和RNAi干擾的植物表達(dá)載體,通過凍融法導(dǎo)入到根癌農(nóng)EHA105中,進(jìn)而通過花序侵染法轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中。通過熒光定量PCR法測定Ac FT1及Ac LFT在擬南芥抽薹前葉片中的相對(duì)表達(dá)含量,觀察轉(zhuǎn)化植株的形態(tài)學(xué)指標(biāo),繼而確定Ac FT1及Ac LFT在洋蔥成花中的作用,為實(shí)現(xiàn)洋蔥抽薹開花的基因調(diào)控提供參考。試驗(yàn)結(jié)果歸納如下:⑴構(gòu)建了Ac FT1的正義植物表達(dá)載體p Z-Ac FT1,反義植物表達(dá)載體p R-AcFT1,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac FT1;構(gòu)建了AcLFT的正義植物表達(dá)載體p Z-AcLFT,反義植物表達(dá)載體p R-Ac LFT,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac LFT.;⑵利用凍融法將重組質(zhì)粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT導(dǎo)入根癌農(nóng)EHA105中,利用花序侵染法對(duì)擬南芥進(jìn)行轉(zhuǎn)化。大豆花葉病毒病分布非常廣泛,是一種世界害,它嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。


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