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顯微鏡發(fā)展至這一階段,是光學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展時(shí)期
顯微鏡發(fā)展至這一階段,是光學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展時(shí)期,尤其是可控的電燈取代自然光使得顯微鏡的使用不再受自然環(huán)境以及地理位置的影響。另外由于電燈的多樣化,以及各種濾光鏡的運(yùn)用,光學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,促使熒光顯微鏡、金相顯微鏡、偏光顯微鏡,倒置顯微鏡等多種類型顯微鏡得以面世。 三目生物顯微鏡(顯微鏡發(fā)展的第三階段3.0) 光學(xué)成像效果取得重大進(jìn)展之后,人們將顯微鏡改善的重點(diǎn)放在了顯微圖像的獲取技術(shù)上。人們?cè)陔p目光路信號(hào)進(jìn)行再次分光,形成三目觀察筒,然后將攝像安裝于三目觀察筒上以獲得顯微圖像。此后顯微影像逐漸成為人們記錄原始信息的重要手段。相比之前提及的顯微繪畫,這種獲取顯微畫面的方式更精準(zhǔn)、更,更先進(jìn)。
熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)采用透射激發(fā)時(shí),可以使用蘭色光線
熒光顯微鏡的調(diào)節(jié) 采用透射激發(fā)時(shí),可以使用蘭色光線根據(jù)普通明場(chǎng)照明法進(jìn)行照明系統(tǒng)的調(diào)節(jié),這包括光源調(diào)節(jié)及聚光鏡中心的調(diào)節(jié)。如果采用暗場(chǎng)聚光鏡,則還需要注意暗場(chǎng)聚光鏡的使用及調(diào)節(jié)方法,當(dāng)用蘭色光線調(diào)節(jié)好后,就可采用更換濾的方法,使標(biāo)本得到所需要的激發(fā)光線照射標(biāo)本,但要注意使遏止濾光片已在光路中,這樣可以保護(hù)觀察者眼睛免受紫外線損傷。 采用反射激發(fā)時(shí),先在光路中加入綠色激發(fā)濾光片組,把照明可變孔徑光闌與視場(chǎng)光闌完全打開(kāi),調(diào)節(jié)光源位置,使照明光束通過(guò)物鏡轉(zhuǎn)換器的螺孔中央并使光源成象于物平面上,此時(shí)物鏡螺孔應(yīng)是通孔(不裝物鏡) 。檢查激發(fā)光束是否通過(guò)物鏡螺孔中央,可在螺孔端面上放置半透明紙觀察光源光斑是否居中,在某些顯微鏡中,光源是在垂直面內(nèi)調(diào)節(jié)其上下左右位置,而光源成象是通過(guò)集光鏡沿軸方向移動(dòng)來(lái)達(dá)到的。 在安裝光源時(shí)要注意光源表面不能沾污手指印及其他斑痕, 以免點(diǎn)燃過(guò)后, 難以清潔,因此,新安裝光源時(shí),使用前燈殼表面可用紗布蘸上酒精等揩檫干凈,此外,還需要注意電極方向,根據(jù)光源要求進(jìn)行安裝,以免發(fā)生意外或點(diǎn)燃不亮,燈管應(yīng)裝入燈箱內(nèi)方可點(diǎn)燃,以防萬(wàn)一傷人。 激發(fā)濾光片及遏止濾光片如何組合使用應(yīng)根據(jù)不同熒光標(biāo)本的激發(fā)方法進(jìn)行選擇,一般也可根據(jù)使用說(shuō)明書推薦的配套方法進(jìn)行選用。
熒光顯微鏡用途
熒光顯微鏡用途 熒光顯微鏡是一種對(duì)能發(fā)熒光的物質(zhì),或經(jīng)熒光色素染色后能發(fā)熒光的物質(zhì)進(jìn)行觀察的顯微鏡。它有如下特點(diǎn): 1、它以紫外光或蘭紫單色光激發(fā)標(biāo)本的熒光。 因紫外光是不可見(jiàn)光, 故由標(biāo)本發(fā)出的熒光與背景反差很大。熒光顯微鏡通常是在黑暗的背景下觀察彩象的,而普通顯微鏡是在亮的背景下觀察較暗的樣品的。熒光顯微鏡的對(duì)比度約為普通顯微鏡的一百倍,因此可觀察到用普通顯微鏡看不到的結(jié)構(gòu)和細(xì)節(jié)。 2、用肉眼或普通顯微鏡觀察經(jīng)熒光色素染色的樣品時(shí), 只可看到整個(gè)標(biāo)本僅以同一顏色著色。而用熒光顯微鏡觀察時(shí),標(biāo)本會(huì)發(fā)出染色色素特有的熒光,呈現(xiàn)出標(biāo)本的彩案,易于鑒別,可減輕眼睛的疲勞。 3、用熒光色素染色,方法簡(jiǎn)單,制作標(biāo)本容易,有利于快速工作。 4、用于染色的熒光色素只要很低的濃度就能發(fā)出明亮的熒光, 一般對(duì)機(jī)體無(wú)毒, 故有利于觀察,如研究功能的變化過(guò)程和細(xì)微結(jié)構(gòu),某些代謝過(guò)程的變化等。 5、利用熒光還有助于分析物質(zhì)的化學(xué)成分。 例如, 組織中有些重要成分能與起作用而發(fā)熒光,拒此可鑒定它們的存在或定位。
在物鏡轉(zhuǎn)換臺(tái)上安裝物鏡時(shí)要注意物鏡的排列順序
物鏡轉(zhuǎn)換臺(tái) 物鏡轉(zhuǎn)換臺(tái)是安裝并更換物鏡的裝置。它由兩個(gè)凸面形的金屬圓盤所構(gòu)成,圓盤上有5-7個(gè)圓形孔洞,每個(gè)孔洞內(nèi)都可以旋入一個(gè)物鏡,在現(xiàn)代顯微鏡中,這種物鏡轉(zhuǎn)換臺(tái)可以借助于上面的平板插入鏡臺(tái)上的楔形道軌內(nèi)。金屬圓盤的平面與鏡臺(tái)的水平方向呈現(xiàn)一定的傾角,剛好使得處于工作位置的物鏡垂直于鏡臺(tái)。物鏡轉(zhuǎn)換臺(tái)在球形軸承上轉(zhuǎn)動(dòng),因此可以很靈活的轉(zhuǎn)換每一個(gè)物鏡;它借助于圓柱軸承調(diào)中,通過(guò)壓力彈簧把轉(zhuǎn)換臺(tái)向下壓,并通過(guò)鋼球把物鏡推向圓盤的支持物上。另外轉(zhuǎn)換臺(tái)通過(guò)在具有很高精密度的缺口中的固定彈簧,可以把物鏡卡在固定的位置。轉(zhuǎn)換物鏡時(shí),當(dāng)一個(gè)金屬圓盤上的楔形突起落入另一個(gè)金屬圓盤的缺口時(shí),會(huì)聽(tīng)到一個(gè)吻合的響聲,物鏡的中心軸正好與鏡筒的軸重合,這時(shí)就應(yīng)停止轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換臺(tái)。在物鏡轉(zhuǎn)換臺(tái)上安裝物鏡時(shí)要注意物鏡的排列順序應(yīng)該按順時(shí)針?lè)较驈牡捅兜礁弑对俚接徒粦?yīng)以反時(shí)針?lè)较蚺帕?,更不可無(wú)次序的胡亂安裝。否則使用時(shí)很不方便,而且容易發(fā)生壓破蓋玻片及撞壞物鏡的危險(xiǎn)。